古朵技术方向| 常用抗凝剂的配制及用法

  在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

  一、肝素

  (1)肝素抗凝作用原理

  肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。

  (2)配制和用量

  纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理盐溶液，用时取0.1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。

  也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2.5～3.0mg/200～300g体质量，兔10mg/kg体质量，狗5～10mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。

  二、草酸盐合剂

  (1)原理

  草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂适于作红细胞比积测定。

  (2)配制方法及用量

  草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg，草酸钾0.8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。

  (3)注意事项

  草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。

  三、枸櫞酸钠

  常配成3～5%水溶液。也可直接加粉剂，每毫升血加3～5mg，即可达到抗凝目的。

  枸櫞酸钠可使钙失去活性，防止凝血。但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5～6%溶液。

  四、草酸钾

  (一)原理和注意事项

  草酸钾为常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。

  (二)配制及使用方法

  取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液，如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。一般如作微量检验，用血量较少，可配制成2%溶液，如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。

  五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)

  EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝。

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