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细胞培养基的分类与选择技术总结

发布时间:2023-03-01浏览次数:708返回列表

  培养基是用来供给细胞营养,促使细胞增殖的,也是细胞赖以生长的环境。细胞培养实验中用量多的就是细胞培养基,虽然细胞培养试验基本技术大同小异,但是每种细胞的培养条件却相差甚远。若偏离某种细胞所需的培养条件,则会导致细胞表达不同的表型。

  培养基种类

  按照来源分类:在动物细胞体外培养实验中,可使用天然培养基(Natural Medium)或是合成培养基(Synthetic/Artificial Medium)。

  天然培养基:源于动物体液或组织分离提取,营养成分丰富且各项条件与体内环境相似,所以培养效果佳,但是由于来源于动物,成分复杂,且批间差较大。

  合成培养基:是由高纯度化学成分(无机盐、氨基酸、维生素、含碳物质等)与纯水配置而成,所有成分都是确定,且可知其确切含量的。

  合成培养基根据实验目的又可分为三种:

  ★ 短时间保存细胞活性

  即各类平衡盐溶液,具有特定的pH和渗透压;能维持细胞离开生物体后几小时内的活性。

  ★ 延长细胞存活时间

  即基础培养基,在平衡盐溶液中添加各种有机化合物或血清,配合适当的实验操作条件,可将细胞培养至多代。

  ★ 特殊功能

  即特殊培养基,根据实验目的-诱导分化、增殖等要求,将基础培养基额外添加各类因子的特殊培养基。

  目前市面上合成培养基种类繁多且使用便利,因此合成培养基目前是使用广泛的。

  培养基一般含有氨基酸、无机盐、维生素、含碳物质和其他营养元素,每种成分对于细胞存活、代谢等功能都有不同影响,不同细胞系需要的成分含量也不同,因此市面上会存在各类培养基配方。

  培养基形式不同,储存体积、价格、使用方式也各不相同。

  因培养基种类繁多,因此,我们简单列举了几种常见基础培养基为大家进行介绍

  1. MEM

  Minimal Essential Medium是基本的培养基, 设计之初是为了培养HeLa细胞以及部分哺乳类的成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。

  2. DMEM

  Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)是目前常使用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。主要用于快速生长的细胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种。DMEM含高浓度的NaHCO3,要用10%的CO?来平衡,当然也可以在较低CO?浓度下使用。

  DMEM-高糖(标准型)适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

  DMEM-低糖(标准型)适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

  3. RPMI-1640

  RPMI-1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

  4. DMEM:F12

  F12培养基成分丰富,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM:F12培养基,作为无血清培养基的基础,以利用了F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。

  该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,可以在DMEM:F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。

  5. McCoy's 5A

  McCoy's 5A Medium早是用于肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代细胞的生长。除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。

  6. M-199

  M-199培养基由Morgan等人研制,是个具有确定化学成分的细胞培养液,原本是用来研究鸡胚原代细胞。除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。主要用于鸡胚成纤维细胞培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞,广泛用于病毒学、疫苗生产。

  培养基 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。