新生牛血清蛋白检测指标有哪些?

  新生牛血清(Newborn Calf Serum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。经大规模混合后除菌过滤制成成品，主要用于动物细胞培养，是医药生物技术产品的重要原材料之一，其质量好坏直接影响细胞生长情况。

  总蛋白含量是新生牛血清需要检查的指标。它属于化学成分的初步分析。有人统计过国产新生牛血清的蛋白含量1，在比较各产区各年份后，发现其含量在3.7%~4.4%之间。进口新生牛血清并不与之*一致。因为国内的血清常采自奶牛，而国外的血清常采自肉牛。蛋白质是新生牛血清的主要成分，在细胞培养中起着维持渗透压、pH 值缓冲、物质运输和提供营养、促进细胞粘附等重要作用。在胎牛血清中，其总蛋白含量要低。

  血红蛋白含量也是新生牛血清一项重要检测指标。它是在血清运输和加工过程中细胞裂解释放到血清中的。之所以检测主要是由于牛血清中血红蛋白具有氧化性，其含量过高会引起羧基的产生和脂质过氧化反应，从而导致生产细胞受损，也会增加下游纯化处理的难度，给药品质量带来安全隐患2。有报道血红蛋白具有神经毒性。在脑皮层细胞的体外培养中，培养24小时后，血红蛋白会造成神经元的广泛死亡(EC50为1-2.5μM)3。在《中国药典》三部(2015 版)中，要求对新生牛血清中血红蛋白含量应不高于200 mg/L，方法主要为分光光度法。

  使用时常见问题及解决方法：

  一、保存血清-好的方法?

  血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

  二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?

  将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

  三、如何避免沉淀物的产生?

  1.解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。

  2.解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生

  3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

  4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

  5.若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

  四、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理?

  欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

  血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。