古朵技术：抗体的制备方法与原理

  抗血清的制备

  有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。

  (一)用于免疫的动物

  作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，-好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，-好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。

  (二)免疫途径

  免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。

  (三)佐剂

  由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。

  佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。

  常用的佐剂是福氏佐剂(Freund adjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9(V/V)，这是不*福氏佐剂，在每毫升不*佐剂加入1～20mg卡介苗就成为*佐剂。

  配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积*或不*佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液(其中加卡介苗3～4mg/ml或不加)，加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内*不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能*乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。

  (四)免疫方法

  抗原剂量，*剂量为300～500μg，加强免疫的剂量约为*剂量为1/4左右。每2～3周加强免疫一次。加强免疫时用不*佐剂，*免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml，加强免疫时不必注射百日咳疫苗。

  在第2次加强免疫后2周，从耳缘静脉取2～3ml血，制备血清，检测抗体效价(见后)。如未达到预期效价，需再进行加强免疫，直到满意时为止(图2-3)。当抗体效价达到预期水平时，即可放血制备抗血清。

  抗体上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量”的方针。