ECC选择性显色培养基实验原理

  原理

  HiCrome ECC显色培养基使用了HiVeg特别蛋白胨替代动物源特别蛋白胨，使得培养基无BSE/TSE风险。该培养基为鉴别培养基，用于初步鉴定来自食品和环境样品的大肠杆菌和其他大肠菌群

  培养基含两种显色原。一种被大肠埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解，产生蓝色至紫色菌落，另一种被大肠菌群的半乳糖苷酶裂解，产生玫瑰红-粉色菌落(1,2)。HiVeg特别蛋白胨和酵母粉提供氮源物质、维生素B和其他必要生长营养素。乳糖提供可发酵的碳水化合物，中性红为pH指示剂。磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为培养基的缓冲液。氯化钠有助于维持渗透压平衡。

  使用前使培养基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(货号MV028)进行1:5或1:10稀释食品样品并进行样品匀浆。将匀浆液0.5ml或1ml用无菌玻璃涂布棒涂布在琼脂表面并在35-37°C孵育18-24小时。孵育结束后对蓝/紫菌落进行计数，并乘以稀释因子。大肠埃希菌的数目以每g食品为单位报告。

  培养基组成    成分    克/升

  HiVeg特殊蛋白胨  5.00

  酵母粉  3.30

  乳糖  2.50

  磷酸氢二钠  3.50

  磷酸二氢钾  1.50

  氯化钠  5.00

  显色混合剂  20.30

  中性红  0.03

  琼脂  15.00

  终 pH (25°C) 6.8±0.2

  配制

  55.83克溶于1000 ml蒸馏水。轻轻加热使培养基完全溶解。15磅(121℃)高压灭菌15分钟。冷却至50℃。混匀并倾注无菌平皿。培养基可能不透明，不过不影响其性能。

  质量控制

  粉末外观：淡粉色均一自由流动粉末。

  成胶性：结实，相当于1.5%琼脂糖凝胶。

  制备好的培养基的颜色和透明度：平皿内为粉红色不透明凝胶。

  配比后的pH值：5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后，pH值自动为6.8 ± 0.2(25°C)。

  培养反应

  35-37°C培养18-24小时后，观察培养反应

  有机体

  生长

  菌落颜色

  大肠杆菌(ATCC 25922)

  旺盛

  蓝/紫

  肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)

  旺盛

  玫瑰红/粉红

  铜绿假单胞菌(ATCC 27853)

  好-旺盛

  稻草色

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