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古朵技术分享:免疫组化和免疫荧光的区别

发布时间:2023-07-13浏览次数:722返回列表

  古朵技术分享:免疫组化和免疫荧光的区别
 

  免疫组化和免疫荧光都经过免疫原,原理相似,只是显色剂不同,免疫荧光是免疫组化技术之一。

  1、免疫组化是应用免疫学的基本原理,即抗原和抗体特异性结合的原理,通过化学反应确定组织细胞中的抗原,使标记有抗体的显色试剂显色,并对其进行定位、定性和相对定量研究。在免疫组化过程中,常用的显示剂包括荧光素、酶、金属离子或同位素。

  2、免疫荧光是一种不会影响抗原和抗体活性的荧光色素,被标记在抗体或抗原上,然后与其对应的抗原或抗体结合,在荧光显微镜下呈现特异性的荧光反应。免疫荧光是免疫组化技术之一,具有特异性强、灵敏度高、速度快的特点。但相对结果判断的客观性不足,技术程序复杂。

  免疫组化与免疫荧光的真正目的均为明确病理诊断,以便患者获得治疗。

  请问你曾经被IHC、ICC和IF所困扰过吗?

  在实验中,有没有一种感觉,就是对免疫组化(IHC),免疫细胞(ICC),以及免疫荧光(IF)傻傻分不清,那么今天我们就来讨论一下这三者的区别,先贴图上来以便有个大致的区分。


 

  从图中我们可以看出,免疫检测技术可以根据报告标签的不同,分为免疫化学和免疫荧光两类,而根据样品类型不同,可以分为组织和细胞检测技术。因此,才会延伸出三个相近的概念。

  为了好的区分这三个概念,我们还可以根据他们的英文词根来分析一下,他们的英文名分别是免疫组织化学Immunohistochemistry (IHC),免疫细胞化学Immunocytochemistry

  (ICC),免疫荧光 Immunofluorescence (IF)。

  词根分析:

  Immuno-指的是免疫技术(例如,抗体和抗原的结合)

  Histo-指的是组织(细胞以及它周围的细胞外基质)

  Cyto-指的是细胞(不包含细胞外的基质)

  Chemistry-在这里指的是化学检测方法(例如,颜色的变化)

  Fluorescence-对被激发的荧光团的检测

  通过对词根的解释,相信你在心中不再迷茫了吧。

  这三个应用技术都属于免疫技术,都是将抗原与抗体的结合可视化,即通过一定的方法可以直接看到实验结果。而常用的方法就是化学显色和荧光显色。如果报告标签是酶促的,就是免疫化学,如果是荧光的,就是免疫荧光。

  其实我们纠结免疫荧光的一个原因还在于免疫荧光的英文名字Immunofluorescence (IF),但若是写成免疫组织荧光(IHF)或是免疫细胞荧光(ICF),那我们是不是就豁然开朗了。虽然这两个词汇在英文文献中应用的还不是很广泛,但不是我自己杜撰的哦,已经有些学者在使用了,规范化应该也只是时间的问题。

  可能文字描述还是有些晦涩难懂,那我们就直接上图吧。先不看下面答案,仅从几张图片,你能明白哪张图代表哪种应用吗?


 

  A免疫组织化学:兔EGFR单克隆抗体(10001-R043-50)—人胎盘

  B 免疫细胞化学:兔α微管蛋白单克隆抗体抗—MEF1细胞

  C免疫荧光组织:兔Cdk5单克隆抗体—鸡脑组织

  D免疫荧光细胞:兔JNK2/MAPK9(10745-R004-50)单克隆抗体—人Hela细胞

  A图和B图是免疫化学(Immunochemistry),这种应用是抗体检测目标蛋白,发生了化学反应,然后显色,根据样本类型的不同,又可以分为免疫组织化学(A)和免疫细胞化学(B)。

  C图和D图是免疫荧光(Immunofluorescence),这种应用根据抗体检测目标蛋白然后通过偶联荧光基团来显色。根据样本类型的不同可以分为免疫荧光组织(C)和免疫荧光细胞(D)。

   上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。