古朵新闻：ELISA实验之洗涤要点

  古朵生物总结ELISA实验要点，希望能对大家的实验有所帮助：

  洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败，ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应讨星中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质，聚苯乙烧等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应巴这种非持异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA提作中，洗涤是主要的关键技术，应引起提作者的高度重视，不得马虎。

  洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工提作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下:

  1.浸泡式

  D吸干或甩干孔内反应液

  0用洗涤液过过洗一遍:3浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1~ 2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短:9吸干孔内液体，吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾上拍干5重复提作0和9，洗涤3~4次。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间.

  2.流水冲洗式流水冲洗法初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸水浸泡2分钟，吸干即可，浸泡式犹如盘浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果为彻底，目也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用干微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果佳。

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