古朵生物：elisa过程中有哪些注意事项

  ELISA实验通用规则

  1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%.可用水和电子天平进行确定.希望有好有专业人员进行矫正.

  2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支.吸取不同的液体后,要换枪头.即使是吸取标准品时.

  3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果稳定.

  4、实验时,要使底物避光保存.

  5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确.

  6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差.

  7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去.

  8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体.也可以用酶标仪的晃动功能.

  9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发.

  10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗加彻底.没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干.

  11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液.加入1/1000的叠氮钠后可长期保存.

  12、底物是光敏感的,要在临用前现配.

  13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上.

  14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触.

  15、待检样品要澄清,否则会影响结果.

  16、温浴时间应遵守试剂盒规定.

  17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性.

  18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证.

  二、下面所提到的是针对我公司的ELISA产品会出现的问题及解决办法

  1.加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低.

  a.原因：未加入酶标记物.

  解决办法：请按照操作步骤进行.

  b.原因：试剂盒内容物未能充分回.

  解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作.

  c.原因：室温太低.

  解决办法：若室温太低(25℃).

  解决办法：若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间.

  b.原因：底物溶液受到污染.

  解决办法：若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用.

  c.原因：反应时间超过太久.

  解决办法：请控制反应时间.

  d.原因：酶标记物污染了盒内其它试剂.

  解决办法：使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净.(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

  4.阴性标准品的吸光值低于阳性标准品的吸光值.

  a.原因：微孔中的试剂未能充分混合.

  解决办法：试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合均匀.

  b.原因：洗板过程发生问题(同2-f.).

  解决办法：请参考2-f.

  c.原因：添加样品或酶标记物的量不一致.

  解决办法：请参考2-d.

  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。