古朵阐述：关于ELISA试剂盒样本的大致处理办法

  一、液体样本

  ELISA试剂盒液体样本处理准则：一切的液体样本，用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，假如今后碰到其他的液体样本，也按这个办法，纳入汇总表。

  1、血清：用无菌管搜集，室温血液自然凝结10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如出现沉积，应再次离心。

  2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应该再次离心。

  3、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  7、细胞培养上清：检测排泄性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  9、蜂蜜：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  10、全血：用含有抗凝剂的无菌管搜集，当即轻轻摇摆，来回轻轻倒置数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝结。

  二、固体样本

  ELISA试剂盒固体样本处理准则：称取1g的固体样本，用9g的适宜缓冲液溶解，排泄蛋白可以直接离心取上清检测，细胞内的蛋白，要先搜集细胞，再用适宜办法破碎，离心取上清测验。

  1、安排标本：切割标本后，称取1g安排，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺或匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。关于植物安排，不好匀浆的话，就在液氮中充沛研磨;

  2、细胞内蛋白样本

  许多待测蛋白不是排泄蛋白，而是存在于细胞内的蛋白，这个时候，要先搜集细胞，洗刷干净，再破碎细胞，离心取上清。

  (1)培养的细胞

  A、动物细胞：用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融(假如重复冻融，破碎作用不好，就采用超声波破碎)，以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  B、植物细胞：用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度到达100万/ml左右，置于冰盒上，用超声破碎仪，设置破碎2s，冷却30s的方法，充沛破碎细胞，以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。

  (2)安排的细胞

  切割标本后，称取1g安排，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺或匀浆器将标本匀浆充沛。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，去除上清，再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗刷沉积的细胞三遍。再用上述的细胞破碎办法破碎细胞。

  3、土壤：称取1g土壤，参加9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手艺将标本充沛混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。假如是测排泄蛋白，直接取上清检测，测验细胞内蛋白，要破碎细胞。

  4、咽拭子：参加2g的pH7.2-7.4左右的PBS，溶解咽拭子头部，摇匀，用镊子取出咽拭子并挤干液体，2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)，细心搜集上清。分装一份待检测，其他冷冻备用，保存过程中如有沉积构成，应再次离心。假如是测排泄蛋白，直接取上清检测，测验细胞内蛋白，要破碎细胞。

  5.植物标本中相关酶或蛋白的测定：(粗提取)

  1、新鲜植物安排请在液氮中充沛研磨;

  2、参加样品体积9倍的提取液(pH?7.4?PBS缓冲液),3、?请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。

  三、ELISA试剂盒样本搜集注意事项

  1、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  2、标本收集后赶快进行实验，若不能马上进行实验，可将标本放于-20℃保存，但应防止重复冻融。

  3、咱们罗列的是通用的样本处理办法，无法涵盖各种样本，关于一些特殊样本，主张实验人员多参阅已宣布的文献，自行设计合理的样本处理办法。

  ELISA试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。