ELISA试剂盒注意事项和具体操作过程

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  ELISA试剂盒注意事项

  1. 取出板条前康复到室温后再打开外包装袋，试验中不必的板条当即放回包装中，密闭封口，其他不必试剂应盖好。

  2. 试验操作中请运用一次性的吸头，避免穿插污染。

  3.试验板孔参加试剂的顺序应共同，以保证一切反响孔的孵育时间共同。

  4.洗刷过程中反响孔中残留的洗刷液应在滤纸上充沛拍干，勿将滤纸直接放入反响孔中吸水。

  5.试剂盒内试剂请在保质期内运用，不同批号试剂不要混用。

  6.1000pg/ml以上的成果为非线性的，根据此规范曲线无法得到准确的成果。大于1000pg/ml 的样品应以规范稀释缓冲液稀释后重做。在成果剖析时，结合考虑相应的稀释度。

  ELISA试剂盒操作过程：关于elisa试剂盒的具体操作过程：

  1.取出试剂盒室温平衡30min，取出血样放至室温。

  2.配规范品：取150uL规范品参加150uL规范品稀释液稀释，顺次稀释5次。

  3.加样：别离于各反响孔中参加规范品50uL，样品40UL，规范品做复孔，样品做3孔。

  4.别离于样品孔中参加10UL抗体。

  5.规范品和样品孔中别离参加50uL链酶亲和素-HRP，盖上封板膜,悄悄震动混匀，37℃温育60min。

  6.配洗刷液：将30倍浓缩洗刷液用蒸馏水30倍稀释后备用。

  7.洗刷：当心揭开封板膜，弃去液体，甩干，每孔加200uL洗刷液，静置30s后弃去，如此重复5次，拍干。

  8.显色：每孔先参加显色剂A 50uL，再加显色剂B 50uL，悄悄震动混匀，37℃避光显色6min。

  9. 停止：每孔参加停止液50uL，停止反响(此刻蓝色当即转为)。

  10.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加停止液10min之内进行。

  11.保存成果，拾掇桌面。

  12.剖析处理数据

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