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ELISA实验丨古朵生物教您如何选择试剂盒
发布时间:2023-10-18浏览次数:660返回列表
ELISA实验丨古朵生物教您如何选择试剂盒
ELISA产品选择要素
根据实验物种及待检样品性质来选择
种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;
样本类型:血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。
根据样品中检测物水平选择
宽动力学检测范围:对样品种待测物水平没有任何参考数据;
高灵敏度试剂盒:待检物含量很低。
根据样本可获得性来选择
通常商品化试剂盒的样品用量在50μL或100μL,也有部分用量可以少至20μL。
供应商资质评估
同行口碑
文献引用
品牌历史
试剂盒关键技术参数
加标回收率
度
灵敏度等
传说中的八大质控指标
规范严格的ELISA厂商会对产品进行质控,联科生物每个指标的ELISA产品说明书都会标注八大质控数据。一起来了解下这些指标的含义~
回收率
将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。复杂的样本基质,如血清、血浆中可能含有干扰因子,影响准确定量目标分析物。的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰),合格试剂盒在60%左右。
稀释线性
样本稀释后,终分析物浓度应该相同,这个就是公认的实验线性。干扰因子会影响实验的线性,除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示,线性介于80-120%为理想结果。
度
在相同条件下,对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量,测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义:
保证一项试验中得到的结果是准确的,并且一次实验到下一次实验结果可重复;
判定两个结果相同还是不同。
通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%,酶标板间变异系数小于8%。
校准
每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。联科生物标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性,所有批次的试剂盒均经过母校准品校对,不会出现结果偏差。
特异性
抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。
ELISA试剂盒包含哪些组分
以双抗夹心法中的二步法ELISA试剂盒为例,ELISA试剂盒一般包含说明书,封板膜,预包被的酶标板,标准品,生物素被标记的检测抗体,链霉亲和素标记的HRP,显色液,终止液,检测缓冲液,标准品稀释液,洗液等十个组分。
ELISA上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。