动物血清的使用指南

  1、储存

  血清的保质期是5年，储存温度-10~-30℃。

  血清长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，长期保存血清必须在-10℃以下储存，并避免反复冻融。

  2、解冻

  将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。

  如果在37℃或高的温度解冻血清，血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶，但不改变血清的性能，同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。

  血清中经常出现的沉淀到底是为何物?

  3、浑浊和沉淀

  所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白，导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。

  如果想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装到无菌离心管中，以低速离心1~2min，上清液即可直接加入到培养基内使用。

  注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。

  血清出现沉淀物后是否该继续使用?

  4、热灭活处理

  通常不使用热灭活血清，除非某些特定的细胞系特别需要。热灭活会降低或破坏血清中的生长因子，影响某些细胞的生长。

  热灭活初是为了灭活补体及支原体。目前，如果血清中出现支原体，可以通过过滤去除;而去除补体通常是不必要的，除非是在准备或检测病毒或细胞毒性试验时。有研究显示，血清37℃孵育就可以灭活血清中热不稳定的补体成分，只有很少一部分细胞在这种灭活血清中生长得好，如胚胎干细胞和许多昆虫细胞。

  1)按正确操作解冻血清，恢复室温。

  2)水浴56℃提前预热。

  3)将准备好的血清和装有相同体积水的烧杯同时放入水浴锅，当烧杯中的温度计指示达到56℃时开始计时，灭活30min后结束，整个过程中需要随时摇晃混匀。

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