姬姆染色液的操作步骤及注意事项

  姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成。Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。

  操作步骤：

  1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂色片染色1分钟。

  2、将姬姆萨染色液B液滴加于A液上面(滴加之量为A液的2-3倍)以洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色3-10分钟。

  3、水洗(冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上)。

  4、干燥，镜检。

  注意事项：

  1. 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。

  2. 涂片染色中 Giemsa 染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

  3. 如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。

  4. 涂片染色和组织切片染色中，pH值对染色有一定影响，载玻片应清洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。

  5. 染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。

  6. 组织切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗，避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。

  7. 0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。

  8. Giemsa组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。

  9. 涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可按Giemsa Stain储存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:1配制Giemsa工作液，充分混匀，即为快速Giemsa染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s后重新加染色液，反复5～10次，其余步骤同上。

  10. 染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。

  11. Regaud固定液: 按3%重铬酸钾:甲醛=4:1配制，临用前混匀，1～2天后失效。

  有效期：24个月有效。

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