直接竞争ELISA试剂盒和间接竞争ELISA试剂盒区别

  因此，间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。因为抑制率越大则斜率越大，从而灵敏度越大。(假设零管变异5%，以两倍SD为灵敏度限，则为90%相对结合率，则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率，因此灵敏度要高。)在进行系统放大时，间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位，所以存在放大效应，从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大，常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素，但模式上似乎不存在放大效应。

  1、直接竞争，标记抗原，与检测样品中的抗原竞争抗体。

  2、间接竞争，标记抗体，固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。

  3、定义间接竞争法的模型：包被抗原，用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab，固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。直接竞争法的模型：包被抗体，用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab，固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。

  4、竞争法的理论基础：是限量抗体。只有在限量抗体基础上，两种抗原才会形成竞争关系。

  5、间接竞争法具备较高灵敏度原因。直接竞争法里，标记抗原与待测抗原均是液相，与抗体的结合机会是一样的，例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体，那么有50%的标记抗原能与抗体结合，所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里，固相抗原与抗体的接触面积较小，固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的，接近顺序饱和法，即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合，同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时，基本上抗体会被待测抗原中和掉，与固相抗原结合的抗体非常少。

  6、间接法的高灵敏度难以实现的原因：双抗体 夹心的免放(IRMA)模式刚出现时，也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免(RIA)，原因也是较大的斜率，但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。

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