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冰冻切片组织三磷酸腺苷酶活性染色试剂盒
发布时间:2023-11-22浏览次数:652返回列表
冰冻切片组织三磷酸腺苷酶活性染色试剂盒
产品说明书
主要用途
冰冻切片组织三磷酸腺苷酶(ATP酶)活性染色试剂是一种旨在使用钙激活技术,在碱性条件下,由三磷酸腺苷酶催化水解产生的磷酸与钙离子结合,经过氯化钴的替换,zui后在硫化铵存在的情况下,呈现组织样本中酶活性部位的棕黑色沉淀现象的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物组织冰冻切片的酶活性检测。也可用于人体肌肉组织纤维的分型鉴定。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,灵敏牢固,显色清晰。
三磷酸腺苷酶或ATP酶(adenosinetriphosphatase;ATPase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应,这一反应放出大量能量,用于运送离子进出细胞,同时供给生物体进行需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位,比如细胞质膜上和叶绿体类囊体膜上等,对整个生命的维持有着重要的作用。膜结合ATP酶存在多种形式:钠钾ATP酶、胞膜钙泵ATP酶(plasma membrane calcium ATPase;PMCA)或肌质网/内质网钙泵ATP酶(sarcoplasmic or endoplasmic reticulum calcium ATPases;SERCA)、氢钾ATP酶(hydrogen/potassium ATPase)或胃质子泵(gastric proton pump)等。
产品内容
碱性液(Reagent A) 毫升
反应液(Reagent B) 毫升
激活液(Reagent C) 毫升
置换液(Reagent D) 毫升
清理液(Reagent E) 毫升
显色液(Reagent F) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存反应液(Reagent B)在-20℃冰箱里,避免反复冻融,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
培养箱:用于反应孵育
小型染色缸:用于染色清洗操作
光学显微镜:用于染色后观察分析1或
酶法冰冻切片人体肌肉组织分型染色试剂盒
酶法冰冻切片动物肌肉组织分型染色试剂盒
实验步骤
实验开始前,将试剂盒里的反应液(Reagent B)从-20℃的冰箱里取出,放进冰槽里融化,避免光照。然后进行下列操作: 一、 样本激活处理
1.取出待测的 5 至 10 微米厚的冰冻组织切片(注意:参见注意事项 3 和 4)
2.小心加上 xx 微升 碱性液(Reagent A)在切片上,铺满整个样品表面
3.小心移去 碱性液(Reagent A)
4.小心加上 xx 微升 反应液(Reagent B),铺满整个样品表面
5.放进 37℃培养箱里,孵育 30 分钟
6.小心移去 反应液(Reagent B)
7.小心加上 xx 微升 激活液(Reagent C),铺满整个样品表面
8.室温下孵育 2 分钟
9.小心移去激活液(Reagent C)
10.重复实验步骤 7 至 9 二次
二、样本染色处理
1. 小心加上xx微升置换液(Reagent D),铺满整个样品表面
2. 室温下孵育2分钟
3. 小心移去置换液(Reagent D)
4. 室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育1分钟
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
6. 小心加上xx微升显色液(Reagent F),铺满整个样品表面
7. 室温下孵育30至60秒;或直至可见棕黑色
8. 小心移去显色液(Reagent F)
9. 室温下,小心将切片置入xx毫升清理液(Reagent E)中孵育2分钟
10.小心移去切片上的清理液(Reagent E)
三、 (选择步骤)样本复染处理
1. 样本复染处理(苏木素)
2. 放上盖玻片或封片
3. 即刻在一般光学显微镜下观察:酶活性阳性部位呈现深浅不一的棕黑色(如果复染,则细胞核为蓝色)
注意事项
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须带手套
3. 建议组织快速冷冻,避免切片冰晶形成
4. 冰冻切片不可固定处理
5. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
6. 本产品可以用于鉴定人体肌肉纤维I型和II型:浅染为I型;深染为II型。如果需要进一步鉴定亚型或动物肌肉纤维分型,建议使用
7. 组织细胞染色注意不要过度
8. 可以使用有机溶剂(乙醇、二甲苯等)脱水、澄清处理后封片
9. 组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
10.本公司提供系列组织细胞酶活性染色试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定显色清晰
染色试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒