ELISA试验中如何防止产生气泡

  ELISA实验过程中，通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围，导致孔中液体不能与孔壁有效接触，使孔内反应不均一。在做实验的过程中，有时为了打干净枪头里面的液体，很容易产生气泡。

  实验过程产生气泡原因及后果：

  1.通常气泡都是聚集在酶标板的孔周围，导致孔中液体不能与孔壁有效接触。

  2.孔内反应不均一。

  3.包被时有气泡的话，将导致包被不完全实际包被量下降,实验结果弱阳性甚至假阴性。

  4.封闭时有气泡的话，将导致大量未结合位点的存在，引起非特异性结合，实验结果本底增高，假阳性。

  5.加样时有气泡的话，抗原抗体不能有效结合，实验结果弱阳性甚至假阴性。

  6.加二抗时有气泡的话，抗原抗体不能有效结合实验结果弱阳性甚至假阴性(竞争法相反。实验结果假阳性)。

  7.加显色液时有气泡的话，实验结果显色不完全。

  8.加终止液时有气泡的话(1、不能完全终止反应 2、影响酶标仪比色，OD值增高)

  9.洗涤时有气泡的话，非特异性结合物不能完全洗去，做无用功。

  一般气泡都是集合在酶标板的孔周围，导致孔中液体不能与孔壁有用触摸，使孔内反响不均一。

  包被时有气泡的话，将导致包被不彻底实践包被量下降--弱阳性乃至假阴性。

  关闭时有气泡的话，将导致很多未结合位点的存在，引起非特异性结合--本底增高，假阳性。

  加样时有气泡的话，抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性。

  加二抗时有气泡的话，抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性(竞争法相反----假阳性)。

  加显色液时有气泡的话---显色不彻底。

  加停止液时有气泡的话，1。不能彻底停止反响 2。影响酶标仪比色，OD值增高

  洗刷时有气泡的话，非特异性结合物不能彻底洗去，做无用功。

  防止办法：

  1。加样时尽量接近孔底(不要触摸孔底)，用力均匀，不要过快过猛。

  2。关闭时一定要加满孔，

  3。洗刷时一定要加满孔(重要)，气泡会浮上来zui终驱除。手艺洗板时一定要吸干水分并用力拍干。

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