ELISA试剂盒操作需掌握的五大要点

  ELISA试剂盒操作较繁杂,在操作中应留神以下5个方面：

  1. 跟着病况的进展或由其他因素影响，某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇，因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中，标本恰当稀释还可下降非特异性反响。

  2. 加样一般运用加液器，在ELISA试剂盒中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加间断液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶结合物、底物和间断液时则不需换吸嘴。

  3.在成批手艺检测中，还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反响和酶促反响时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不留神可能会导致过错效果或定量不准。

  4. 洗刷是ELISA试剂盒操作过程中决议实验胜败的一个关键步骤。目的是除掉未结合的免疫反响物，间断抗原抗体反响，除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。

  5. 断定效果须运用ELISA试剂盒测读仪，比色法判读可选择单波长或双波长，根据反响液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。酶标仪具有杰出的重复性。

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