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Annexin V流式检测细胞凋亡的数据分析方法

发布时间:2022-10-16浏览次数:1045返回列表

Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) ()或未加药 ()处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。

Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITCPI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。

实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

流式检测细胞凋亡的数据分析方法:

1) 选中所有颗粒,将FSC和SSC设置成对数坐标轴模式备用;

2) 将横轴和纵轴分别设成Annexin通道和PI通道(7-AAD与此类似),选取双阴细胞群;

3) 在双阴细胞门中,将横轴和纵轴分别设成FCSSSC,将数据呈现方式改为轮廓图,找到细胞碎片,划出碎片门,应用于所有细胞;

4) 在所有细胞中,反选碎片门,得到所有细胞;

5) 将横轴和纵轴分别设成Annexin通道和PI通道,参照未经药物处理的对照组,划出十字门,确定不同群细胞的比例。