Elisa试剂盒人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)Elisa试剂盒说明书

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人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)Elisa试剂盒说明书  操作步骤：
1.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照说明书在小试管中进行稀释。
2.  加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4.  配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.  温育：操作同3。
8.  洗涤：操作同5。
9.  显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光(OD值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
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