植物中脂氧合酶（LOX)测试盒

植物中脂氧合酶（LOX)测试盒品牌： 进口保存条件： 2-8度数量： 大量保质期： 1年规格： 50管/48样

  北京杰辉博高生物技术有限公司依托国家重点实验室建立，是由具有资深生命科学、生物技术背景及留学归国人员共同创办的高新技术企业。
公司专业经营生物科学领域的实验仪器、研究试剂和实验室耗材，致力于向国内外生物科学研究人员提供一流的服务。
目前，公司推出的产品涵盖了生物化学、分子生物学、免疫学、细胞生物学等相关领域，因优质稳定、性价比高等特点在广大科研机构、研究院校及相关企业中赢得了良好的声誉，从而建立了立体的营销网络和拥有广泛的客户资源。
公司向广大用户提供优质产品的同时，始终将客户服务和技术支持放在比产品销售更重要的位置上，公司聘请了专职、兼职技术支持人员，为客户提供专业性、个性化的技术服务。
公司秉承"先做人，后做事"的理念，坚持"以质量为生命，以客户为中心"的宗旨，把最优质的产品和最贴心的服务奉献给广大客户。

植物中脂氧合酶（Lipoxygenase, LOX）活性测定试剂盒说明书 
  紫外分光光度法   植物中脂氧合酶（LOX)测试盒
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。   
货号：BC0320 
规格：50 管/48 样 
产品内容：   
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。   
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。   
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入 5mL试剂二，充分溶解。   
产品说明：  植物中脂氧合酶（LOX)测试盒 
LOX广泛存在于植物组织中，催化不饱和脂肪酸氧化反应，导致膜脂过氧化。在植物的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。   LOX 催化亚油酸氧化，氧化产物在 234nm 处有特征吸收峰；测定 234nm 吸光度增加速率，来计算 LOX活性。   
自备仪器和用品：   
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。   
植物中脂氧合酶（LOX)测试盒
操作步骤： 
一、粗酶液提取： 
按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。   
二、测定：   
1.  分光光度计预热30 min，调节波长到 234 nm，蒸馏水调零。   
2.  试剂二在25℃水浴中预热30 min。   
3.  空白管：依次在 1mL石英比色皿中加入100µL蒸馏水、800µL试剂二和 100µL试剂三，迅速混匀后于234nm 比色，记录 15s 和75s 的吸光值，分别记为 A1和 A2。   
4.  测定管：依次在1mL石英比色皿中加入100µL上清液、800µL试剂二和 100µL试剂三，迅速混匀后于234nm 比色，记录 15s 和75s 的吸光值，分别记为 A3和 A4。   

注意：空白管只需测定一次。 

三、LOX活性计算公式：   

（1）按照蛋白浓度计算   
活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化 0.001 个单位为 1 个酶活单位。   LOX (U/mg prot) = [(A4－A3)－(A2－A1)]×V 反总÷(Cpr×V样)÷T×1000   = 10000×[(A4－A3)－(A2－A1)]÷Cpr 
  （2）按照样本质量计算   
活性单位定义：25℃中每克组织每分钟催化吸光值变化 0.001 个单位为 1 个酶活单位。

LOX (U/g) = [(A4－A3)－(A2－A1)]×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T×1000   
= 10000×[(A4－A3)－(A2－A1)]÷W 

Cpr：上清液蛋白浓度，mg/mL，需另外测定，建议使用本公司 BCA蛋白质含量测定试剂盒；
V 样：加入反应体系中上清液体积，100µL=0.1mL；V 反总：反应总体积，1mL；V 样总：上清液总体积，1mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1min。   

注意事项：   
1． 试剂三易自发氧化，从而导致空白管测定值偏高，必须临用前配制，并且当天使用完毕。   
2． 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日完成酶活性测定。

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