今天我们就来谈一谈非洲猪瘟检测问题，因为按照规定，没有经过允许，是不能做非洲猪瘟检测的，但现在猪场可以检测，我们根据猪场检测的结果发现，国产的试剂盒的特异性、敏感性相差很大，比如说核酸提取有两种方法：AB法， 还有一种PCR检测的免提法，没有纯化的过程，就是核酸提取，检出效果很低，所以在核酸提取上我们建议用AB法，就是裂解加纯化的方法。这是我们在对比研究过程中发现的一个问题，所以建议就不要用免提法，免提法中还有很多方法，有些差，有些稍微好些，但总体上是不能达到满意的程度。
    还有一种方法就是测试卡法，就是一个测试板，上面有两根线，一个P线，一个C线，然后将血滴到上面，然后通过渗透的方式到两条线上，如果两条线都出现，就是阳性，如果只有C线出现就是阴性，如果都不出现就是实验不成立。这种方法在非瘟的检测上，是一点意义都没有的，除非是猪都已经死掉了，而且含有大量病毒的时候，我们用全血来检测，这时候可能会起到判断的作用，但是他的特异性也不强，检测方法比以前的要差好多倍，这种东西在生产上的意义不大。检测不准，一分钱都是贵的，检测准，一百块都是的。所以这个试纸卡是不建议在生产上使用的，还是静下心来研发提高他的检测敏感性，检测卡就不要推出市场了，检测卡应该退出市场，不要用了，浪费资源，耽误疫情。
    PCR检测中的免提法的误差应该说是不可接受的，个别的会很好，但是大部分是不好的， 这种情况就很麻烦了，农业部没有规定，说哪家免提法好，哪家不好，是没有规定的，所以大家就在市场上自由选择，因为大部分就不好，所以你选择就不好，前一步都错了，那后一步也会有问题，所以在非瘟防控上面，我们说要打人民战争也好，要防控也好，但是前提是我们要知道病毒在哪里，我们生物安全做到什么程度要知道，所以检测的准确性是非常非常重要的。所以检测中的测试卡，我们把它排除了，免提法有待进一步提高，建议用 AB 法。
    监测非瘟，用血检会严重滞后
    接下来一个问题就是采血检查，是非常准，但是这也是一个非常大的错误。我们知道一个病毒要感染一头猪，先是病毒从口腔内进入，有些人做实验，说病毒先从血液中出现，那是把病毒打到血液中，那肯定就先出现，如果是自然感染的情况下，两猪接触那肯定是口腔先出现，口腔中出现后，比如说这个猪身体很弱，那三天血液中就会出现，短三天，长一个月以上40天左右，有可能将出现病毒，原来说潜伏期19天，不是这个概念，可能潜伏期长，那么在这样一个长的潜伏期，唾液当中的病毒在猪的生活过程当中就不断的污染环境，等你这个猪厌食了，发烧了，呕吐了，你这个时候再检，你前面可能已经污染了，病毒就在环境中大量的袭击，就耽误了一个时间，就叫检测的时效性问题，所以我想用血液检测就严重滞后了，当血液中检测到病毒时就已经晚期了。
    像西班牙是有一个专门的团队，血检后整个猪场都要清理掉，我们现在很多猪场是拔牙式清除，比如说这一栋有问题就把它清掉，不断地拔，对整个行业的损失性太大了，所以我们发现了这个规律后，就推广唾液检查，因为唾液上出现问题把它去掉，损失就小一点。
    为什么您建议用唾液检测监测疫情？
    因为我们研究唾液研究很长时间了，我们是研究圆环跟蓝耳的唾液检测，当时我们发现有个错误，以前我们测蓝耳的时候，我们是根据平均血液当中的蓝耳的感染量，在保育猪的感染量是30%，但是在唾液中是70%，也就是说检血液他的漏检量是40%。然后圆环在血液中是30%左右，但是检唾液是90%到，有就是漏检 60%到70%，漏检了2/3.那么我们就发现唾液检测的效率要比血液高，然后我们就不断的跟踪研究，就发现采血对猪的伤害太大了，采血你这个猪可能一个星期不长肉了，那这样对生产影响很大的，但是采唾液就不存在这个情况，猪是很愉快的咬盖子，然后我们把盖子拿出来，把唾液采出来。国外当时是用一根绳子挂在猪圈里面，因为绳子很长，采唾液很麻烦，所以我们就用一个袋子，猪把袋子吞进去了，我们用绳子一拉，然后一挤就出来了，然后就很干净，主要是检测效率高。
    那么在蓝耳跟圆环检测效率这么高的基础上，对非瘟的检测效果会怎么样？我们委托那些猪场用唾液检测的方法，发现检测出的时间要早很多，河北、云南、浙江都开始做唾液检测研究了，准备推广这种方法。因为非洲猪瘟采血还有一个麻烦的方式，人需要进去到猪舍里面，要去抓猪，假如这个猪有病毒的话，他会挣扎会把病毒释放出来，人接触了这个猪，人又会带病毒，然后再去采下一头猪的时候，就把病毒带到下一头猪了，如果是不同的栏，这就造成了另一个栏也污染了，这个就不好了。
    唾液检查比血液检查会好，一个就是唾液里面的病毒量没有发病的猪的病毒高，但是如果那个猪不发病，那么那个血液当中根本就没有病毒，这样想就是唾液的检测有意义。根据现在的统计学资料，国外开始越来越重视唾液的检测，但我们还没有跟上这一步，因为我早期去美国，他们在蓝耳的时候就开始检测了，后来我们回来研究就发现不能用绳子而是用手提袋，加方便。
    收集唾液的袋子你可以自己做，有些猪场也有生物安全柜，你用纱布就可以做一个，也还有简单的，就是用口罩剪个洞往理念塞上棉花也可以做。总而言之，只要猪咬上那个东西能把海绵吸进去就行了。1毫升左右就够了。其实我们一般采样会采5-6毫升，或者10毫升，时间一般是1-2分钟。
    唾液送到哪里检测？保存多久准确度高？
    送到哪里都行，一般的兽医站都可以检测，自行检测结果取决于PCR反应的时间，有些快的可能20分钟，有些可能久点。
    血液需要冷藏，唾液跟血液一样，唾液从猪场到检测实验室的时间，可能会发生各种各样的变化，一般要求是要冷藏来降低酶的活性，我们会发现25度是非常危险的温度，比如说你在猪场采的，里面是有病毒的，然后过一段时间，血液中的病毒可能会被血液中的东西给杀掉，就没有了。唾液也是一样，唾液里面有很多酶，这可能会把病毒给杀掉。这就出现一个问题，比如查这个猪的健康度，猪比较健康但唾液却有问题，所以我们在采集唾液的时候， 我们在试管里面会加上核酸酶抑制剂，唾液只要一挤进去，核酸酶抑制剂就立即会跟唾液混合，把酶给抑制住了。我们发现，至少在冷藏的情况下，一般是两个星期不会发生变化，这样就稳定了。送检的时候，还是要冷藏运输，一般在里面放一个冰袋，保持4-8℃。
    采集唾液，怎么避免交叉感染？
    我们16年就开始研究了，那时候还没非洲猪瘟。相对比进猪舍去采血要安全多了，方法简单，猪会比较安全，用一次性手套拿一个封存一个。
    抽血是一个非常糟糕的事情，我们现在的想法是想把注射器消灭掉，因为本身针头本身就是带着恐惧，现在就是要解决这样一个问题，所以我们这一代就看能不能解决掉这个注射器的问题。
    唾液收集这个方法很快就能学会，大概2-3分钟就可以。采血就不一样了，要学好多天，可能还学不会，我采血都是跟广东动检的一个人学的，所以我们现在就想推广唾液检测这种方法。一个是考虑动物福利，还有关键就是口腔里面的病毒比血液里面多，出现早，一般血液都是比较干净的，如果血液里有比较多病毒，那就是病毒血症。
    用唾液检测监测疫情，怎么抽查好？
    如果这个地方不是疫区，我们建议就按照场里的计划，比如一个季度或者一个月随机抽查， 如果是疫区建议每天抽查，随机抽查就要看你要知道多少的可信度，如果，那就是全查，如果是95%，那可能抽查25-28头就够了，比如想把母猪作为一个群体，想要达到95%的可信度，那么抽查28 头猪，那样就够了。现在很多兽医工作者，以为猪群越大，采样的就需要越多，其实按照随机原则都是一样的。具体看你怎么分群体。
     为什么抽查28 头？这个是生物统计的概念，大样本抽样，按照抽样的基本差。数据就是25-28。这个就是抽样，就像人口普查一样，并不代表每个地方都要查到，是分一个点，随机抽样来的数据。抽样判断总体。很多兽医不知道，还以为是按照百分比。
    非洲猪瘟，口腔的传播，到血液传播，到粪便的传播，所以一个地区如果污染了，夏天下雨多的地方也比较麻烦，比如两广，地下水也会变得很危险。
    您有听说过有复养成功的吗？
    复养基本没有成功的，环境已经污染了，猪苗引进回来也带毒，养猪所有的做法还跟以前是一样的。疫区是很难成功的，所以这种情况下一定要养种猪，需要改掉以前的饲养模式，终消灭非洲猪瘟的是猪不是人。
    哨兵猪其实也存在风险，比如养少量猪的时候密度小，发病风险高，小猪可能不发病，长大了才发病，当大规模进猪时，它可能又发病了。水源、环境的安全性没法改变，能改变的只有猪的抵抗力。当然，可以打深水井，70米以上的，那个水质我们研究过，没有问题。
    水如果感染病毒，应该是几天就会发病。东北就有个老太太请人吃了四次盒饭，喂了猪以后猪三天就发病了，在这次非洲猪瘟疫情中，损失大的一般都是大企业。不死的猪一般分为两种情况，康复猪的抵抗力特别强，也有猪一点抵抗力没有。现在所有的工作都建立在“保猪”上，没有猪啥都是空的。
    您对养猪业怎么看？
    这个问题比较难，就看你从哪个角度来看，比如你可以说养猪业的灾难来了，从另外一个角度，机会来了。猪少了，就会研究控制这个病的方法，人总能找到一种方法来研究提高猪的抵抗力，包括检测方法的改善；生物安全角度而言，生物安全级别提高，很多其他病毒都可能净化掉，企业可能会有生存危机，但行业不会消失。
    唾液检测，其实也只有唾液检测才有价值。因为此时还没有出现病毒血症，猪粪排毒还没出现，拔牙式清除还来得及。

    血检发现病毒阳性，已经晚了，大量粪便排泄很难隔和清除，场内净化也很难做到，后续就慢火连营了。这也是为什么很多猪场拔牙清除都失败的原因。

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