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选购凝胶成像系统时需考虑的重要因素

发布时间:2019-02-15浏览次数:1978返回列表

凝胶成像系统几乎是每个分子生物学实验室的必需品。几十年来,凝胶成像的设备已经从简单的紫外线和宝丽来相机发展到的数字化数据采集和分析系统。它的用途是从琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上分离的DNA中获取信息。

目前很难研究市场,并确定谁是凝胶成像系统的客户,因为这个系统的应用如此广泛。“这是一种无处不在的技术。如果你身处生命科学领域,你就需要用到凝胶成像系统。”在此,我们就介绍一下选购凝胶成像系统时需考虑的重要因素。

灵敏度和动态范围
尽管一些DNA成像应用只需要粗略的测定或“有没有”的结果,但大多数的研究人员还是希望获得佳的数据质量。在选购凝胶成像系统时,灵敏度和动态范围往往是两个重要的考虑因素。

很多人认为,相机分辨率是评估系统灵敏度的佳参数,“事实上,灵敏度是通过大的镜头光圈、出色的低噪声相机、电子噪声的进一步深度冷却以及样品与光圈的近距离来实现的。”她提醒说,拼接(binning)的做法可能牺牲CCD相机的分辨率。它允许在图像捕获时收集多的光,但通过降低像素总数来降低总的分辨率。

灵敏度是开发凝胶成像系统时优先考虑的事情。的成像系统,适合DNA和蛋白凝胶。它带有500万像素的相机和广角f/1.2镜头,以提供高分辨率和快速图像捕获。这个系统还可以升级到-57ºC的CCD冷却相机,用于化学发光成像。

新一代的成像系统的进步包括“灵敏的相机和光学元件,以及一键式的图像捕获和分析自动化”。

动态范围与灵敏度密切相关。动态范围宽,则意味着在同一幅图像中可检测到低水平和高水平的样品。对于某些应用而言,动态范围是重要的考虑因素,例如监控刺激化合物的影响或抑制剂对表达的影响。

在评估凝胶成像系统时,数据采集的一致性也需要认真考虑。“动态范围宽的技术有助于各块凝胶之间获得一致的数据。确保技术是面向未来的。出版社很关心数据的可靠性和重复性,因此你需要确保你的系统每天提供稳定的数据。系统是否能做什么来消除凝胶或印迹之间的差异,这是很重要的。”他说。

多功能
尽管一台简单、专用的凝胶成像系统似乎是一个不错的选择,但大多数客户感兴趣的是多功能的系统,这指的是所分析的凝胶类型、检测方法和应用范围。为此,许多制造商生产出多功能的仪器,如多重荧光检测、兼容比色样品,甚至有多的应用,如Western分析或组织切片分析。

生命科学部就提供一系列激光扫描仪,有着灵活的应用。它的Amersham Typhoon 5生物分子成像仪可以对荧光、放射性标记和比色样品进行成像、除了适用于DNA凝胶、蛋白凝胶和印迹,这个系统还可以成像和分析微孔板、培养皿、组织切片及其他许多样品类型。

除了激光扫描仪,GE还提供了两款CCD相机系统 – Image Quant LAS 500和的Amersham Imager 600,可用于DNA凝胶成像。研究人员在选择成像仪时,应当考虑是否需要化学发光检测。“如果用户主要对化学发光感兴趣,那么我们建议用CCD成像系统。如果荧光成像的灵敏度和分辨率加重要,则建议使用激光扫描仪,”他说。

安全性和易用性
目前市场上有一个趋势,就是凝胶成像的自动化。这意味着,你只要将凝胶放入系统中,按下按钮就能完成分析。大多数系统提供一定程度的自动化。例如,UVP的GelDoc-It TS3配备了广泛的自动化功能。VisionWorks软件可以利用预设的拍摄参数,如自动曝光、对焦、缩放等实现一键式的图像采集。

用户考虑的另一个因素是安全性,这主要涉及到EB的使用。大家都知道,EB是诱变剂,需要特殊处理。平时,人们都会使用手套、防护设备,并防止仪器被EB污染。如今,许多安全的染料可用于DNA凝胶,而仪器制造商也对成像系统进行了相应的优化,以支持这些安全的选择。

易用性也是产品的一大特点。它的产品包括入门级Gel Doc EZ系统、功能全的Gel Doc XR+系统,以及适用于工业规模凝胶成像的GS-900校准密度计。“我们投入了大量精力让这些系统加易用,”Miller说。这包括大部分凝胶成像工作的自动化,比如缩放和对焦。

如今,DNA凝胶成像系统的市场十分成熟,也充满竞争,在每个价格点都有多个选择。总的来说,个体需求和具体应用始终是要的考虑因素,比如仪器在特定染料上的表现及检测方法的切换能力。人们也许很难找到仪器在特定应用中的一对一比较数据,因此需要密切留意产品资料,并与销售代表沟通。当然,这个系统应当是面向未来的,考虑到现在及将来的需求。