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新闻中心

鸡抗非洲猪瘟病毒抗体检测

发布时间:2019-06-24浏览次数:1847返回列表

    由于市场上没有销售鸡抗猪抗体检测试剂盒,所以实验室只有自建ELISA检测方法,通过对包被液、封闭液、待检样品浓度、酶标抗体浓度、显色时间等条件的摸索,确定佳条件,同时做了特异性检测。确定判定标准为OD450nm≧0.826时判定为阳性。
    步骤:
    1、全病毒用包被液稀释以佳浓度包被酶标板,100uL/孔,4℃过夜。
    2、拿出包被的酶标板回复室温,弃包被液,280uL/孔 PBST洗涤3次,每次3min,拍干。
    3、加入合适的封闭液,100uL/孔,37℃封闭1h,拍干。
    4、待检测样品用抗体液稀释到佳浓度,100uL/孔,37℃孵育1h,洗涤3次,拍干。
    5、HRP-兔抗鸡 二抗,用抗体稀释液按佳浓度稀释,100uL/孔,37℃孵育45min,洗涤3次,拍干。
    6、用TMB显色试剂盒,按说明依次加入溶液A,溶液B,室温避光反应。









                                                          (本文内容来源于网络,如有侵权请联系我们删除