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普通基因扩增和PCR的区别
发布时间:2013-12-19浏览次数:1161返回列表
PCR是聚合酶链式反应的英文缩写,它是一种基因扩增技术,应用这个技术的仪器叫PCR仪,或者叫基因扩增仪。普通PCR仪是定性的,荧光定量PCR仪可以定量。通常说基因扩增仪是指普通PCR仪。
PCR需要注意以下事项:
1.模板尽量避免含有酶抑制剂!
2.引物保存时间不易过长,要符合引物涉及的原则,在用软件设计结束后要进行适当的人工处理。引物浓度要合适,太高容易引起错配及非特异性产物的形成。
3.循环参数一般退火温度应低于Tm值5℃。先循环数次,然后延伸几分钟,再进行循环,有时候可以加大产物的量。
4.酶浓度过高容易导致非特异性产物的形成。
5.离子浓度过高容易导致非特异性产物的增加。
6.dNTP浓度过高会抑制酶的活性。