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探讨蔓荆子黄素对单核巨噬细胞的影响

发布时间:2018-09-11浏览次数:1696返回列表

摘要 :目的:通过蔓荆子黄素对小鼠腹腔巨噬细胞活性及 RAW264.7 细胞增殖和凋亡作用的研究,探讨蔓荆子黄素对单核巨噬细胞的影响。

方法:分别用含有不同浓度蔓荆子黄素作用于小鼠腹腔巨噬细胞与小鼠单核巨噬细胞 RAW264.7,于 24、48 及 72h 后采用 CCK-8 检测细胞活性。

使用:AO/EB 染色观察 RAW264.7 细胞凋亡变化 ;应用流式细胞仪检测 RAW264.7 细胞凋亡率。通过荧光探针 DCFH-DA 检测 RAW264.7 细胞活性氧水平,使用 JC-1 染色标记线粒体膜电位的变化。

结果:CCK-8 法检测结果显示,蔓荆子黄素对小鼠腹腔巨噬细胞的细胞活性及 RAW264.7 细胞的增殖都有抑制作用,呈剂量与时间依赖关系,尤其对具有增殖能力的 RAW264.7细胞活性抑制作用更强。AO/EB 染色结果显示,RAW264.7 细胞经浓度为 5 及 10μmol/L 的蔓荆子黄素处理后,细胞表现为凋亡形态 ;流式细胞仪检测结果显示,蔓荆子黄素诱导RAW264.7 细胞 Sub-G 1 期代表凋亡细胞的百分比增加( P <0.05)。蔓荆子黄素作用于 RAW264.7 细胞后,细胞内活性氧水平提高;JC-1 染色结果显示,蔓荆子黄素能使 RAW264.7 细胞的线粒体膜电位下降。

结论:蔓荆子黄素能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞与小鼠单核巨噬细胞 RAW264.7 活性,尤其对具有增殖能力的 RAW264.7 细胞活性抑制作用更强,可以促进其凋亡,其作用机制与增加细胞内活性氧水平和降低线粒体膜电位有关。蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆或蔓荆的干燥成熟果实,在我国zui早的药学专著《神农本草经》列为上品,记载有“主筋骨间寒热,湿痹拘挛,明目,坚齿,利九窍,去白虫”。蔓荆子为临床常用中药,其性寒、味辛苦,入肝、胃、膀胱经,具有疏散风热、清利头目的功效,用于治疗风热感冒头痛、齿龈肿痛、目赤多泪、目暗不明及头晕目眩等症。

有研究表明,蔓荆子具有镇痛、抗炎、降压、抗菌、祛痰和抗肿瘤等作用。主要成分含挥发油、微量生物碱、维生素 A、蔓荆子黄素、蔓荆子碱及 γ- 氨基丁酸等。其中,蔓荆子黄素被认为是主要有效成分之一,药典规定不得低于0.030% 要求,一般含有量在 0.027% ~ 0.139%之间。

蔓荆子黄素(Vitexicarpin),又称为紫花牡荆素(Casticin),属于多甲氧基黄酮类化合物,具有抗肿瘤、抗氧化、抑制炎症反应和免疫抑制等多方面的药理作用。近年来在抗肿瘤作用方面,有研究显示蔓荆子黄素对乳腺癌、肺癌、宫颈癌、肝癌及胃癌等多种肿瘤细胞有较强的增殖抑制活性,有可能作为植物来源的抗肿瘤候选药物。

另外,其免疫调节作用也较早受到关注。YOU 等zui早报道,蔓荆子黄素能够有效抑制小鼠 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞的增殖。MESAIK 等研究发现,蔓荆子黄素能够对单核细胞的氧化裂解产生显著的抑制作用,对嗜中性粒细胞的趋化性和植物凝血素刺激的 T 淋巴细胞也显示抑制作用。林珊等采用乙酸诱导的小鼠腹膜毛细血管通透性增加的模型,发现蔓荆子黄素具有明显的体内抗炎作用。

王红英等研究发现,紫花牡荆素可能通过调节细胞因子改善佐剂性关节炎小鼠足跖肿胀度。上述研究显示,蔓荆子黄素治疗炎症或免疫调节性疾病可能有良好应用前景,然而目前为止,对属于免疫细胞的单核 / 巨噬细胞作用的研究未见任何报道。本研究通过对小鼠腹腔巨噬细胞的细胞活性以及对单核巨噬细胞 RAW264.7 的细胞增殖、凋亡的研究,来揭示蔓荆子黄素对免疫的调节作用。

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