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大鼠Elisa试剂盒操作流程与注意事项

发布时间:2021-01-08浏览次数:961返回列表

大鼠Elisa试剂盒操作流程:

1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。

2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。

4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。

5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。

6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。

7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。

8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。

9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。


大鼠Elisa试剂盒注意事项:


      1. 大鼠Elisa试剂盒解冻与存放:-20℃取出后建议放入2~8℃冰箱中解冻约,每隔一段时间轻轻摇晃均匀,不可直接放入温度较高处解冻,避免因温度改变太大,造成蛋白质凝集而出现沉淀,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,建议无菌分装,再放回冷冻,避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。


     2. 大鼠Elisa试剂盒是否灭活:加热可灭活血清中补体系统,在极少数情况下(培养ES细胞,平滑肌细胞时)建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭活血清。血清灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。


     3.大鼠Elisa试剂盒培养基:无血清培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,血清仍然是培养液中基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。




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