elisa测定试剂盒检测程序：

1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。

8.  每孔加入100ul 终止液混匀。

9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

elisa测定试剂盒步骤：

1.加样

 1. 除包被外都需45度加样

 2.加样体积要准确

 3.管底加样，不能加在管壁上

 4.加样时不能产生气泡

2.温浴  

 1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

 2.各ELISA板不应叠在一起。

 3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

 4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。

3.洗涤  

 1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。

 2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板  

 1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。

 2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质