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血清的质量把控详述

发布时间:2023-12-25浏览次数:615返回列表

      目前Hyclone 、Gibico、Biowest、Life-iLab、Gemini等品牌血源用户相对较多,可信度较高。但由于血清产品的特殊性,同一品牌的血清不同批次的血清也会有很大差异。

    血清的种类:现常用血清主要是牛血清、人血清、马血清等。其中牛血清来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解,故而是常用的血清。牛血清有小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。

  血清的质量标准:

  1. 内毒素标准为不高于5EU/ml

  2. 总蛋白含量胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高偏低都会影响实验的正常进行

  3. 血红蛋白标准为不高于20mg/dl

  4. pH。国产血清、大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,根据PH的高低可用来初步鉴别血清的来源

  5. 微生物。包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等,大多都能清除。大肠杆菌噬菌体无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,在国产血清中几乎90%以上都存在,是影响国产血清质量的重要原因之一

  在实际筛选时,主要从血清外观和实验操作时细胞的生长状态进行。

  从外观上:

  1. 颜色:根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血,因为胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂;

  2. 澄清度:高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡;

  3. 血清沉淀:血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有影响,沉淀的产生原因跟加工生产方式、是否反复冻融密切相关,在实验操作中可能会对细胞观察产生影响。

  从性能上:

  1. 细胞形态,在进行血清筛选时首先观察细胞的生长形态是否产生明显变化,以及观察贴壁细胞的贴壁情况,细胞在不同血清培养中可能会出现形态上的差异;

  2. 倍增时间,一般情况下会选择倍增时间短的血清,值得注意的是血清的影响会传至5代,在进行测试时,好培养五代后进行计倍增时间的计算。

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