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抚生试剂-细菌培养基制作

发布时间:2014-06-24浏览次数:987返回列表

细菌培养基制作
      原方法存在问题:一是捆扎的试管管口竖放, 灭菌结束又冷却10min, 高压锅盖上的冷凝水, 容易打湿棉塞, 为杂菌污染创造条件。二是排除冷空气的操作不安全,锅内有压力时排除冷空气, 由于内外的压力差, 容易冲掉棉塞, 而且需要2次操作, 更增加了不安全的因素。
      改进方法:1)在竖放的试管上放少量棉花, 使之弓起成馒头形, 上用聚丙烯薄膜盖好, 四周的薄膜要置于试管与内锅内壁之间。2)加温后, 就把放气阀打开, 当有水蒸汽冒出, 持续2~3分时, 关闭放气阀。上述做法优点:一是高压锅盖上的冷凝水可沿凸起的薄膜流人内锅底, 薄膜少量的冷凝水可被放置的棉花吸收, 这样可保持棉塞的干燥。二是只需1次操作, 就能彻底排除冷空气, 且安全可靠。
2、搁置斜面
      原方法存在问题:从高压锅内刚取出的试管, 棉塞未干就摆斜面, 容易沾杂菌抱子而染杂;而且温度在迅速下降的过程中, 会使试管壁上形成冷凝水, 对菌丝生长不利。
      改进办法:1)灭菌结束后, 锅内余水, 用虹吸管抽出。2)操作者戴湿手套将整捆试管叠放于锅内的木条上, 所摆斜面的长度同教材。3)盖上锅盖, 稍留缝隙, 放在火上加热片刻以烘干棉塞。4)培养基缓慢冷却后, 直接放人接种箱内。
3、培养基的分装
      原方法存在问题:分装时间长时, 琼脂易凝固, 还需要再加热、再分装, 工序麻烦,每管分装的数量靠眼去把握, 容易出误差操作须特别小心, 稍不留意培养基就会沾在管口或管壁上。
      改进方法:将配好的培养基倒入方形盘内, 待其自然冷却后, 用小刀切成相等的方块再分别装人试管内。这样培养基不沾污管口和管壁、分装量可自由调整, 且不受温度限制, 能保证分装均匀, 单人、多人均可操作。
4、加棉塞
      原方法存在问题:没有阐述棉塞的制作方法, 学生不知道如何制作, 也没有阐述合格棉塞的标准, 学生制作时, 把握不住棉塞的松紧度。
      改进方法:棉塞的制作, 取适量的棉花根据试管的大小确定, 做成均匀的方片、将相邻的边分别折叠一下, 再卷成1个棉柱, 将有毛茬的一端折转平贴在棉柱上, 并把此端塞入试管口2/3, 管外部分不少于1cm。检查棉塞的松紧度:将棉塞提起, 试管跟着被提起而不下滑, 表明棉塞不松;将棉塞拔出, 可听到轻微的声音, 表明棉塞不紧。 

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