23132/87细胞，细胞株培养
发布时间：2016-05-04浏览次数：729返回列表
胞内出现颗粒或空泡。
细胞内如果出现颗粒物质，表明细胞处于非健康状态。
同样，细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。
产生空泡可能是老化或是细胞状态不好。
如果发生在单层细胞：一个具有双折射性的正常细胞逐步失去这一特征（相差显微镜下细胞边缘成晕环），则提示该细胞已经死亡，即终干枯死亡。
如果发生在悬浮细胞：正常悬浮细胞清晰透明，如胞内出现颗粒或变浑浊表明细胞受损，甚至死亡。
怎样去除死细胞？单层培养的细胞死亡后，一般会漂浮起来，因此不需要特殊处理。
而悬浮细胞或原代培养细胞则要通过密度离心（如Ficoll梯度）方法收集死细胞。
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23132/87细胞，细胞株培养细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
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