基因在人胃癌组织和细胞株中的表达及其意义
发布时间:2015-11-13浏览次数:842返回列表
基因在人胃癌组织和细胞株中的表达及其意义
目的:本实验采用实时荧光定量PCR、Western Blot法以及免疫组化SP法分别检测fascin1在胃癌细胞及胃癌组织中的表达,进一步分析fascin1的表达水平和胃癌患者临床病理参数的相关性。
方法:本实验由两部分组成:
1.将正常胃粘膜上皮细胞株GES-1,不同分化胃癌细胞株MKN28、SGC-7901、MKN45分别种到25cm²培养瓶,待细胞长到80%-90%融合时,选择生长状态良好的细胞进行RNA和蛋白质的提取后。
2.采用免疫组化SP法检测fascin1在80例胃癌组织标本中的表达水平,同时取距离肿瘤组织>5cm的癌旁正常胃粘膜20例作为正常对照,并结合患者的临床病理参数统计分析这些参数与 fascin1之间可能的关系。
结果:
1.实验中提取的细胞RNA和蛋白质经过质量测定,均符合实验要求。
2.实时荧光定量PCR和Western blot分析法结果显示:正常胃粘膜细胞及不同分化胃癌细胞株均有fascin1mRNA和fascin1蛋白的表达。
3.免疫组化显示fascin1阳性表达主要位于胃癌细胞的胞浆和胞膜,胃癌间质中的血管内皮细胞亦可见fascin-1阳性染色。