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所在地:上海
型号:CHO-K1
更新时间:2020-04-21
浏览次数:1180
公司地址:上海市嘉定区沪宜公路
市场部(女士) 经理
公司主营三大产品:(一)自主创新的Deco品牌Elisa试剂盒,采用进口原料试剂,用先进专li技术,严格按照标准生产方案,预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10 %,完善的售后服务和免费的技术支持免去您的后顾之忧,价格优惠,为广大客户提供更方便,更标准的产品服务。(二)2014年素尔生物正式成为荷兰SCL胎牛血清大陆总代理,囊括南美源胎牛血清和澳洲源胎牛血清,胚胎干细胞专用胎牛血清,产品质量好、价格低,和同类产品相比竞争力强,素尔同样常备国内外知名品牌血清/胎牛血清,囊括Hyclone胎牛血清、Hyclone马血清、Gibco胎牛血清、Gibco新生牛血清、Ausgenex特级胎牛血清、Gemini血清、PAA优级胎牛血清、clontech血清、Biochrom胎牛血清等,干冰运送,顺丰寄出。(三)拥有完善的细胞库管理体系,供应上万种类细胞株细胞系,公司细胞技术60%为硕士和博士学历,其中明星产品有:DC2.4细胞、RAW264.7细胞、COV434细胞、HO-8910细胞、A2780细胞、SK-OV-3细胞、OVCAR-3细胞、OVCA433细胞、HEK-293-6e细胞、FRO细胞、HEPG2.2.15细胞、HL-7702细胞、L-02细胞、M-ICC12细胞、143B细胞、HOS细胞、M4e细胞、M2e细胞、TU686细胞、TU212细胞、vero细胞、SW48细胞、SW480细胞、NCCIT细胞、B16-F10细胞、HK-1细胞、Hep2细胞、C666-1细胞、HNE1细胞、HNE1/DDP细胞、capan-1细胞、vero e6细胞、A375细胞、Hs294T细胞、HSC-LX-2细胞、LOVO细胞、MKN-28细胞、RL952细胞、Hela细胞、A549细胞、Ishikawa细胞、EBC-1细胞、H1993细胞、H1993细胞、Hep-2细胞、NCI-H441细胞、LS174T细胞、NCCIT细胞、capan-1细胞、Hep3B细胞、HUVEC细胞、SW116细胞等。
素尔(suer)生物以客户为核心,以产品质量求生存,以售后服务求信誉。我们通过不断改进来提高效率,绝不以牺牲品质作为代价。“诚信、创新、严谨、专业”愿以饱满的热情期待各界朋友携手合作,共创辉煌的明天!
CHO-K1细胞,CHO-K1细胞株,CHO-K1价格 常见问题及解决办法:
1)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
2)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
3)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
CHO-K1细胞,CHO-K1细胞株,CHO-K1价格 之细胞消化不下来原因:
1)有可能是你的培养液没有去除干净,因为培养液可以中止消化。所以建议用PBS冲洗两次。然后再加EDTA.
2)加大EDTA的浓度 ,可以选择0.1%与trypsin混合使用,加大以上溶液的体积,可以用2ml。
3)37度温度要够。
4)实时查看,当看到镜下细胞折光度有改变,就是有作用,然后用培养液将细胞冲洗下来。
5)用冰D-Hank's液洗细胞两次;
6)用刚解冻的冷的胰酶(注意不要37度孵育)1-2ml/100ml的培养瓶,开过口的和时间长的都不用。
免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
原理:
当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质x的抗体免疫沉淀x,那么与x在体内结合的蛋白质y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
优点:
(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;
(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;
(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
缺点:
(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;
(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;
(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。
注意的问题:
(1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40或Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2%SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂。
(2)使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。
(3)使用对照抗体:
单克隆抗体:正常小鼠的IgG或另一类单抗
兔多克隆抗体:正常兔IgG
在免疫共沉淀实验中要保证实验结果的真实性,应注意以下几点:
(1)确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的,而并非外源非特异蛋白,单克隆抗体的使用有助于避免污染的发生。
(2)要确保抗体的特异性,即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀。
(3)确定蛋白间的相互作用是发生在细胞中,而不是由于细胞的溶解才发生的,这需要进行蛋白质的定位来确定。
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