四环素类抗生素自1948年问世以来，陆续被应用于临床，并已成为应用多，的广谱抗菌素。但在1956年，有人发现了四环素会使牙齿变色的副作用，随后还发现了它甚至会使指甲和巩膜变色。

四环素结构式

样品预处理

将动物组织解冻，均质，称取5.0g样品，加入4.8%的高氯酸溶液20mL，漩涡混合30S，超声提取振荡20min，3000r/min离心5min，取上清液，待净化。

样品净化

SPE柱：Welchrom BRP(500mg/6mL)

活化、平衡：6mL甲醇，6mL超纯水

上样：在水达小柱上层筛板时，加入待净化液。

淋洗：6mL超纯水，流出液弃去。

洗脱：5mL甲醇，收集洗脱液。

样品浓缩

洗脱液40℃下水浴氮吹至近干，1mL甲醇-水（V:V=3:2）复溶，溶液过滤0.22μm滤膜，HPLC进样分析。