上海复祥生物科技有限公司

上海复祥生物科技有限公司

[仪器交易网认证,请放心拨打]
咨询
热线
400-821-8510
高级版会员 第12年 认    证:企业信息已通过认证
主营业务:ATCC 细胞肿瘤细胞,细胞,ATCC 菌种,CMCC 菌种,
联系方式

联系人:李

电话:400-821-8510

手机:15000266580

邮件:xiangfbio@163.com

联系时,请告知信息来自仪器交易网

新闻中心

质控菌种的保存法有哪些?

发布时间:2018-09-03浏览次数:1469返回列表

    不同菌株应采用不同的保藏方法,可选择使用冻干保藏、利用多孔磁珠 在-70℃保藏、使用液氮保藏或其他有效的保藏方法。那么,质控菌种的保藏方法有哪些呢?
1、长期保存法
(1)低温冷冻保存法
  厌氧菌在低温条件下新陈代谢处于抑制状态,不繁殖也不死亡。培养基包括脱纤维羊血、兔血或马血,20%脱脂牛乳,7.5%葡萄糖的马血清。
  将待保存菌株(培养24-48h)加入上述培养基中,封好瓶口,置-70℃液氮或-70℃低温冰箱中保存。菌种不同,保存时间也有差异,zui长可保存10年,zui短可保存2年以上。
(2)冷冻真空干燥法
冷冻真空干燥法的培养基(保存剂)有以下2种。10%-20%脱脂牛奶加入0.1%的谷氨酸钠和0.03%的L-半胱氨酸,煮沸15min消毒,冷却备用。10%蔗糖与马血清的混合液,过滤灭菌,并置厌氧环境中预还原,分装备用。

将培养基48h左右(处于生长静止期)的厌氧菌落或菌苔刮下,加入一定量的上述培养基,混匀分装于安瓿中,置-20℃低温冰箱中迅速冻结,再放入冷冻干燥机内,抽真空16-24小时,然后将安瓿封口,置4℃环境下长期保存。

2、短期保存法
(1)疱肉培养基保存法:用牛肉渣和牛肉浸出液制成疱肉培养管,接种待保存菌株,然后在液体表面覆盖1-50px的石蜡,再将培养基垂直放置片刻,待石蜡凝固置35℃培养(无芽孢厌氧培养72h,普通梭菌培养24h,产期荚膜梭菌和多枝梭菌培养2周左右),zui后置室温或-20℃保存。发酵糖类的厌氧菌每个月转种1次,不发酵糖类的厌氧菌3-6个月转种1次。
(2)半固体培养基保存法:在上述液体培养基中加入0.2%-0.5%琼脂,制成半固体培养基,接种时用毛细管将待保存的厌氧菌的菌液加入半固体培养管底,表面加入1-50px厚度的液体石蜡,密封管口,35℃培养48小时,置室温或-20℃保存。
(3)丙三醇乳剂培养基保存法在厌氧菌液体培养基(含胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、L半胱氨酸和维生素k等)中加入少量牛肉渣分装于长试管中,接种待保存菌株,置35℃培养48-72h,取出后加入无菌丙三醇(按1:1比例),盖紧盖子后用石蜡封口,置4℃或-20℃保存。此法适用于保存脆弱拟杆菌、产黑色素普雷沃菌和具核梭杆菌。