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紫外检测仪(性能双光束双波长)/双波长紫外检测仪型号:DP-1 波长范围:254nm、280nm(同...
型号:DP-1
波长范围: 254nm、280nm(同时检测)、 可在254nm、280nm-400nm谱线之间任选两个波长同时检测。 内置数据处理 ,双显示屏。 蛋白质280nm/254nm双波长测定: 蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质,其吸收峰在280nm波长处,且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系,故可作为蛋白质定性、定量测定的依据,正因为如此,280nm处的紫外吸收法通常被用于层析系统中蛋白质浓度的连续监控。但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同,故要准确定量,必需要有待测蛋白质的纯品作为标准来,或且已经知道其消光系数作为参考。另外,不少非蛋白物质在280nm波长下也有—定吸收能力,可能发生干扰。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶碱)的影响更为严重。在280nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在254nm处的吸收更强,其吸收峰在254nm附近。核酸254nm处的消光系数是280nm处的2倍,而蛋白质则相反,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值。通常: 纯蛋白质的光吸收比值:A280/A254 && 1.8 纯核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5 因此蛋白质溶液中同时存在核酸时(生物体系大多数如此),同时测定OD254nm,与OD280nm。然后根据两种波长的吸收度的比值,通过经验公式校正,以消除核酸的影响而推算出蛋白质的真实含量。 蛋白质浓度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml) 此经验公式是通过系列已知不同浓度比例的蛋白质(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所测定的数据来建立的。 |
应用范围: 性能双光束紫外检测仪,用于 蛋白质、酶、核酸、核苷酸、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它任何有紫外吸收的生物/非生物样品的分离分析、流动检测。 1.光 源: 紫外光谱灯,光源使用寿命达1小时 (等同于外AKT品的光源),仪器可不关机连续工作; |
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