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甲状腺激素反应基因(THRSP)检测试剂盒使用说明书

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  • 更新日期:2017-03-29 11:34
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详细介绍
 甲状腺激素反应基因(THRSP)检测试剂盒实验材料与试剂配制:
1.仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2.洗液的配制:按1:30的比例配制洗液备用。
操作步骤:
1.取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。
2.分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准
品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。
标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul 加入
一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第三只
试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第五只试管中,充分
混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。稀释后各管浓度分别是:
800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L,50ng/L ,0ng/L。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3.加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中先加样
品 40ul 然后再加生物素标记的抗 IFN-γ 抗体 10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
4.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 50ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
7.温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
8.洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。
9.显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。
10.终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。
11.读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。
 甲状腺激素反应基因(THRSP)检测试剂盒注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的 30 分钟内,以免影响准确性。
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 甲状腺激素反应基因(THRSP)检测试剂盒
 
 
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