KFS175 钠离子 Na+荧光探针说明书

钠离子 Na+荧光探针 SBFI, AM

Cat number：KFS175

Store at -20℃ for 12 months，避光

For Research Use only

一、产品描述

Na⁺敏感型染料,SBFI 和 K⁺敏感型染料,PBFI，是钠钾离子浓度测定时所用到的选择性荧光指示剂。这类苯并呋喃间苯二甲酸酯的衍生物以及其具有膜透性的乙酰氧基甲基酯形式（AM 酯）可以在生理条件（含多种其他一价阳离子）下，给予钠钾离子浓度以上时间及空间上准确的变化测量精度。

此外，这类染料的激光光谱可以选择用与 Fura-2 类似的滤光器与检测仪。.这些钠钾探针指示剂由荧光团与氮冠醚成环状连接，赋予各自的配位体选择性。在 pH7，且 Na 或 K 离子缺失的情况下，SBFI 和 PBFI 的消光系数大约在 42,000 cm^-1M^-1（346 nm）。一旦与离子结合，其激发峰显著收窄，zui大激发峰向短波段偏移，光能量吸收比值变为 340nm/380nm。SBFI 结合 Na 离子之后荧光强度约增强 2.5 倍，但发射光谱zui大值基本不变。pH6.5~7.5，这类荧光素的光谱特性基本维持不变，相比较而言，离子浓度和粘度对其影响更大。

虽然这类离子指示剂有相当的选择性，但对于 Na 离子亲和的 SBFI 来说 K 离子同样有一定的影响，PBFI 也是如此。在 K 离子生理浓度下，SBFI 对于 Na 的 Kd 值为 11.3mM，而没有 K 离子存在时，则为 3.8mM。SBFI 对 Na 的选择性比 K 要高出 18 倍。

同样地，PBFI 对 K 离子的解离常数也强烈地依赖于 Na 的存在。Na 的是否存在，使得 PBFI 对于 K 离子的 Kd 从 100mM 到 10mM不等。虽然 PBFI 对于 K 离子的选择性仅仅高出 Na 的 1.5 倍，但在细胞的生理条件下，通常 K 离子的浓度要高于 Na 的 10 倍以上。所以，在胞内加载探针时，这些探针的 Kd 值应与适当的载体做校准。

SBFI,AM 光谱特性：Ex/Em=340nm/500nm。分子量为：1127.06。

二、产品包装

三、操作说明

用无水 DMSO 制备 SBFI 酯类的储液，浓度为 10mM。SBFI AM 的相对分子量分别为 1127.由于这类 AM 酯形式的探针水溶性比较差，建议溶解时，使用必要的 Pluronic F-127.通常可以在进行加载探针到细胞之前，将探针的 DMSO 溶液与等体积 25%（w/V）的 Pluronic F-127 混合。探针加载浓度范围：5μM~10μM，孵育时间 40 分钟~4 小时。具体的加载条件能参考相关文献或者实验摸索，因为该探针在不同的细胞内的 Kd 值不同。校准细胞内 SBFI 的 Kd 可以用短杆菌肽抗生素。

一般来说，这些指示探针可以用340nm 激发光激发，但在380nm 荧光对于目的离子的浓度尤其敏感。发射峰的检测可以设置在500nm，计算 Na⁺浓度。