人血小板抗体（APA）ELISA试剂盒实验原理

人血小板抗体（APA）ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人血小板抗体(APA)水平。用纯化的抗原包被微
孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入血小板抗体(APA)，再与HRP标记的抗
原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP
酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板
抗体(APA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样
品中人血小板抗体(APA)浓度。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
800ng/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
400ng/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
200ng/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
100ng/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
50ng/L1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
然后再加待测样品10µl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
 PYD 人胶原吡啶交联 规格： 48T/96T
 PCP 人胶原C端肽酶 规格： 48T/96T
 DAF 人降解加速因子 规格： 48T/96T
 PCT 人降钙素原 规格： 48T/96T
 CGRP 人降钙素基因相关肽 规格： 48T/96T
 CT 人降钙素 规格： 48T/96T
 BFP 人碱性胎儿蛋白 规格： 48T/96T
 ALP 人碱性磷酸酶 规格： 48T/96T
 bFGF-9 人碱性成纤维细胞生长因子9 规格： 48T/96T
 bFGF-6 人碱性成纤维细胞生长因子6 规格： 48T/96T
 bFGF-4 人碱性成纤维细胞生长因子4 规格： 48T/96T
 bFGF 人碱性成纤维细胞生长因子 规格： 48T/96T
 Cx 人间隙连接蛋白 规格： 48T/96T
 ALK 人间变性淋巴瘤激酶 规格： 48T/96T
 TAb 人甲状腺素抗体 规格： 48T/96T
 T4 人甲状腺素 规格： 48T/96T
 TG 人甲状腺球蛋白 规格： 48T/96T
 TAb 人甲状腺抗体 规格： 48T/96T
 TBG 人甲状腺结合球蛋白 规格： 48T/96T
 TPO 人甲状腺过氧化物酶 规格： 48T/96T
 THAA 人甲状腺非肽激素抗体 规格： 48T/96T
 TSI 人甲状腺刺激免疫球蛋白 规格： 48T/96T
 PTHrP 人甲状旁腺激素相关蛋白 规格： 48T/96T
 PTH 人甲状旁腺激素 规格： 48T/96T
 AFP 人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格： 48T/96T
 fMet 人甲酰甲硫氨酸 规格： 48T/96T