大鼠乙酰胆碱酯酶AChE检测试剂盒检测原理和问题分析

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心法：抗大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的乙酰胆碱酯酶(AchE)会与单抗结合，游离的成份被洗去。加入酶标抗体，抗大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体与结合在单抗上的大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有乙酰胆碱酯酶(AchE)，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，乙酰胆碱酯酶(AchE)浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中的乙酰胆碱酯酶(AchE)浓度。

选用生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造。适用于体外定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中天然重组大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)浓度。仅供科研使用，使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。
问题分析

若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后

联系我公司技术支持为您解决问题。

我是按照实验步骤进行测定的，但是没有任何信号，为什么？

◆ 对于使用HRP底物的比色测定，终止液的加入会使底物变色。而说明书推荐的波长就是zui适波长。

◆ 通过轻拍酶标板的边缘充分混合孔内试剂。加入终止液的时，颜色由蓝变黄（如果是HRP

底物）。如果加终止液之前孔内试剂没有混合，则底物颜色变绿。

◆ 可能加入试剂的顺序错误。

◆ 加入底物溶液以后不要清洗酶标板。

◆ 在连续稀释时确定已经加入标准品。

◆ 如果底物系统中有两个成分，则必需混合均匀。

◆ 确定酶标仪的使用和操作正确。

◆ 确定试剂，标准品，样品都正确配制并按照说明滴加无误。

◆ 对于高敏感性试剂盒，确定使用的底物和放大剂都正确稀释。