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P1158/pInt噬菌体基因质粒说明书

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  • 更新日期:2020-07-16 15:10
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详细介绍
别名:     NM_020347.4;BBS17
复制子:     pUC
原核抗性:     Amp
克隆菌株:     DH5a
培养条件:     37度
质粒宿主:     大肠杆菌
质粒用途:     基因模板
片段类型:     cDNA
片段物种:     人
原核抗性:     Amp




一、载体分类及载体组成元件
载体分类
1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体
病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体或是细胞培养中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。用于基因治疗和疫苗的病毒载体应具备以下基本条件:
(1)携带外源基因并能包装成病毒颗粒;
(2)介导外源基因的转移和表达;
(3)对人体不致病;
(4)在环境中不会引起增殖和传播。
   非病毒载体一般是指质粒DNA。


2、按进入受体细胞的类型分类:原核载体、真核载体、穿梭载体(含原核和真核2个复制子,能在原核和真核细胞中复制,并可以在真核细胞中有效表达)。
3、按功能分类:克隆载体、表达载体
克隆载体:具有克隆载体的基本元件(Ori,Ampr,MCS等),可以携带DNA--pian段或外源基因进入受体细胞并克隆和大量扩增DNA-pian段(外源基因)的载体。
   表达载体:克隆载体中加入一些与表达调控(具有转录/翻译所必需的DNA顺序)有关的元件即成为表达载体。


载体组成元件
1、复制起始位点Ori:即控制复制起始的位点。Ori的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向)。
2、抗生素抗性基因:可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+
(1)Ampr:水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。
(2)tetr :可以阻止四环素进入细胞。
(3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮霉素β失活。
 
 
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