产品名称:维多利亚蓝胶原纤维染色液
规格:2×100ml
分类:结缔染色
储存条件:室温,避光,12个月
用途:胶原纤维染色、分型
注意事项:丽春红染色后不能与水接触,直接用无水乙醇脱水。
产品简介:
维多利亚蓝胶原纤维染色液可用于胶原纤维和弹力纤维双重染色,重复性好,对比清晰,色彩鲜艳且不易褪色。
配制方法:
维多利亚蓝2g,糊精0.5g,间苯二酚4g,蒸馏水200ml。将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5分钟。然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中,继续煮沸3分钟,不断搅拌溶液呈胶体状。去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸一起放在60。C恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末,再将其溶于400ml的70%乙醇液中。然后加浓盐酸4ml和苯酚5g,放置至成熟后使用。
染色方法:
(1)组织切片厚6um,脱蜡至水。
(2)将切片入70%乙醇中洗2min。
(3)直接浸入盛有维多利亚蓝液瓶中染0.5h。
(4)入95%乙醇中分色数秒钟。
(5)蒸馏水洗2min。
(6)用天狼星红饱和液染切片15min。
(7)无水乙醇直接分化脱水。
(8)二甲苯透明,中性树胶封固。
结果:
胶原纤维呈红色,弹力纤维成蓝绿色,红细胞及肌肉呈黄色。
注意事项:
1、悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。
2、Formazan 的生成不仅与活细胞数成比例,也受作用时间的影响,因此当样品较多时测定的OD 值可能随时间而变。
3、MTT 溶液为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT 溶液在4℃或较低温度情况下会凝固,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。