产品简介
从细胞/组织样本中纯化不含苯酚的总RNA,配有基因组DNA去除柱独特的gDNA Eliminator柱,无需DNase处理 数分钟内得到高品质RNA,提取流程方便快捷 产物RNA不含苯酚 RNA在敏感的下游应用中表现出色,如real-time RT-PC
公司简介
北京冬璞泰和科技有限责任公司 (Beijing Dongputaihe Technology Co.,LTD) 是一家专注于生命科学研究领域的高科技企业 。公司以“聚焦生命科学,发展科研技术”为中心理念,为广大科学工作者提供包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、临床诊断等领域的试剂、耗材、抗体、仪器等相关产品,其服务行业涵盖生命科学基础研究、临床疾病诊断与控制、生物制品的开发与应用、制药、商品检验检疫、人口与健康、食品安全以及农林牧渔等诸多领域,面向客户群体有各大医学院、医科大学、生命科学院、农林业大学、研究所、医院、卫生防疫部门、检验检疫部门、公安系统、制药公司、生物技术公司等单位。
冬璞泰和 与国内外各大生物领域保持密切合作关系,凭借深厚的行业人脉和丰富的专业经验为广大科研用户提供更强大的技术支持和产品动态。
冬璞泰和 注重用心与客户沟通,定期学习先进技术,积极建立完善及系统的市场网络,使公司能稳健地持续发展;力求用专业化,简单化,快速化的服务,帮助人们享受健康的生活。
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产品说明
从细胞/组织样本中纯化不含苯酚的总RNA,配有基因组DNA去除柱
- 独特的gDNA Eliminator柱,无需DNase处理
- 数分钟内得到高品质RNA,提取流程方便快捷
- 产物RNA不含苯酚
- RNA在敏感的下游应用中表现出色,如real-time RT-PCR和RNA-Seq
RNeasy Plus Kits将快速方便的RNA纯化步骤和有效去除基因组DNA污染整合在一起。使用该试剂盒能够从多种培养细胞和易裂解组织中纯化获得高纯度、高产量RNA。RNeasy Plus Mini Kit 一次能够纯化获得100 µg总RNA(〉200 nt),并且去除基因组DNA。RNeasy Plus Micro Kit则适用于样本量较少的情况,可分离获得45 µg总RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现自动操作,可用RNA
later RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本。
性能
使用RNeasy Plus技术从细胞和组织中提取RNA,产物不含基因组DNA,产量高、可重复性好,适用于敏感的下游应用(参见Effective cell genomic DNA removal, Effective tissue genomic DNA removal, High, reproducible RNA yields和Array-ready RNA)。从组织和培养细胞中提取的RNA完整性Agilent RIN数值接近10。
该试剂盒纯化产物不含短于200个核苷酸的RNA(如rRNA和tRNA),因此有富集mRNA的效果。如需从培养细胞中分离获得含有小RNA(如miRNA)的总RNA,我们提供专门的分离方案作为补充,请参见产品使用手册。
原理
细胞和易裂解组织先在含有异硫氰酸胍的高变性Buffer RLT Plus中裂解和匀质化,能使RNases立即失活,以保证分离到完整的RNA。裂解液再流过gDNA Eliminator柱。该离心柱与高盐缓冲液共同作用,可选择性的去除基因组DNA。加入乙醇以提供RNA结合的合适条件,样本再加入到RNeasy离心柱。含有硅胶膜的特制离心柱能特异性的结合裂解细胞中的RNA。
对于多脂和难裂解组织,推荐使用RNeasy Plus Universal Kits。对于高通量的总RNA纯化,推荐使用RNeasy Plus 96 Kit。如需从其他类型样本中分离含有miRNA的总RNA,推荐使用miRNeasy Kits。
操作流程
RNeasy Plus Micro Kit能从多达5 x 105个细胞或5 mg组织中分离总RNA,RNeasy Plus Mini Kit能够从107个细胞或30 mg组织中分离总RNA。简洁的工作流程可在25分钟内纯化得到已去除基因组DNA的RNA。样本先被裂解和匀质化。裂解液流过gDNA Eliminator柱,在流过gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,样本再上样到RNeasy离心柱。RNA结合到膜上,污染物被洗去。获得高品质RNA,RNeasy Plus Micro Kit的洗脱体积为14 µl,RNeasy Plus Mini Kit的洗脱体积为30 µl。
处理不同的起始样本可用不同的实验方案。实验方案的不同之处主要在于样本的裂解和匀质化。样本上样到gDNA Eliminator柱之后的步骤就类似。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)进行组织破碎和匀质化时,可能会产生过多泡沫。在破碎和匀浆前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(单独提供)可充分减少泡沫产生。Reagent DX经仔细检测,表明配合此试剂盒使用不会影响RNA的纯度或下游应用。
应用
RNeasy Plus Kit纯化得到的RNA适合对少量DNA污染敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR和RNA-Seq。纯化得到的RNA还可用于其他应用。
RNeasy Plus Micro Kit适用于小样本,包括:
- 激光显微切割冰冻切片
- 细针穿刺
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