48T/96t 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒

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中文名：人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA 试剂盒
应商：上海古朵
规格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6个月
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
运输方式：现货供应，一般为快递运输，江浙沪隔天到，外地及偏远地方三至五天时间到货。
检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。


人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒 操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。


人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒 常见问题以及解决方法：
1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻；
2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理；
3、洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动；
4、显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况；
5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒；
6、读板：读板的时候先应该保证板的清洁干净；
7、严格按照说明书操作。


检测试剂注意事项：
1.  此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精que度，造成吸光度偏离的假像。
7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。



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