特别提示:包括collagen II免疫组化试剂盒(IHC)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:collagen II免疫组化试剂盒(IHC)
产品货号:KFS023
产品规格:50T
本试剂盒可用于免疫组织化学方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本Collagen II抗原分布。
本试剂盒适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞涂片等。我司即用型一步法免疫组化检测试剂盒与常规免疫组化染色试剂盒相比,具有高灵敏性、高特异性及操作简便的优点。多个HRP聚合物直接与二抗相连,大大放大了抗原抗体结合的信号,减少了孵育步骤,孵育时间缩短为10分钟。试剂盒不含有生物素,完全避免了内源性生物素造成的背景影响。试剂盒提供的DAB显色试剂为增强型显色试剂,且自带稀释液,避免了由于水质的不同对DAB显色造成的影响;与一般DAB试剂相比,增强型的稳定性显著提高,显色更醒目,敏感性更高。
注意事项
1. 检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2. 增强剂中含有0.1% ProClin 300 防腐剂,使用时请注意自我防护。
3. DAB 显色液需现用现配,避光放置,且在2 小时内染色。
4. 在超过有效期的试剂盒中一种或多种试剂的活性可能降低,因此不得使用过期的试剂盒,不同批号间试剂盒也不能交叉混用。
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名称:十二烷基磺酸钠
货号:BTN131049
规格:100g
本产品是促进溶解的理想去垢剂。在SDS(十二烷基)中碳链长度的独特分布利于在凝胶电泳实验中溶解病毒蛋白。可用于需要在SDS-PAGE后进行复性的实验(如果按照Blank,等的方法处理凝胶来去除C14和C16烷基磺酸盐)。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
名称:SDS-PAGE电泳液(干粉)
货号:BTN81203
规格:5L
本产品为干粉型SDS-PAGE电泳液,加水配制后即可直接用于SDS-PAGE电泳,非常方便。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
名称:SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
货号:WE0286
规格:200ml
本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,zuì佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与zuì佳分离范围
SDS-PAGE 分离胶浓度
|
zuì佳分离范围
|
6%胶
|
50-150 kD
|
8%胶
|
30-90 kD
|
10%胶
|
20-80 kD
|
12%胶
|
12-60 kD
|
15%胶
|
10-40 kD
|
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
分离胶浓度
|
凝胶体积
|
所需各组分体积(单位:ml)
|
纯水
|
30%Acr-Bis(29:1)
|
分离胶缓冲液(4×)
|
10%APS
|
TEMED
|
6%
|
5ml
|
2.75
|
1.0
|
1.25
|
0.05
|
0.004
|
10ml
|
5.5
|
2.0
|
2.5
|
0.1
|
0.008
|
15ml
|
8.25
|
3.0
|
3.75
|
0.15
|
0.012
|
20ml
|
11
|
4.0
|
5
|
0.2
|
0.016
|
8%
|
5ml
|
2.42
|
1.33
|
1.25
|
0.05
|
0.003
|
10ml
|
4.8
|
2.7
|
2.5
|
0.1
|
0.006
|
15ml
|
7.25
|
4.0
|
3.75
|
0.15
|
0.009
|
20ml
|
9.7
|
5.3
|
5
|
0.2
|
0.012
|
10%
|
5ml
|
2.08
|
1.67
|
1.25
|
0.05
|
0.002
|
10ml
|
4.17
|
3.33
|
2.5
|
0.1
|
0.004
|
15ml
|
6.25
|
5.0
|
3.75
|
0.15
|
0.006
|
20ml
|
8.3
|
6.7
|
5
|
0.2
|
0.008
|
12%
|
5ml
|
1.75
|
2.0
|
1.25
|
0.05
|
0.002
|
10ml
|
3.5
|
4.0
|
2.5
|
0.1
|
0.004
|
15ml
|
5.25
|
6.0
|
3.75
|
0.15
|
0.006
|
20ml
|
7.0
|
8.0
|
5
|
0.2
|
0.008
|
15%
|
5ml
|
1.25
|
2.5
|
1.25
|
0.05
|
0.002
|
10ml
|
2.5
|
5.0
|
2.5
|
0.1
|
0.004
|
15ml
|
3.75
|
7.5
|
3.75
|
0.15
|
0.006
|
20ml
|
5
|
10.0
|
5
|
0.2
|
0.008
|
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
凝胶体积
|
所需各组分体积(单位:ml)
|
纯水
|
30%Acr-Bis(29:1)
|
浓缩胶缓冲液(4×)
|
10%APS
|
TEMED
|
2ml
|
1.14
|
0.34
|
0.5
|
0.02
|
0.002
|
4ml
|
2.28
|
0.68
|
1
|
0.04
|
0.004
|
6ml
|
3.42
|
1.02
|
1.5
|
0.06
|
0.006
|
8ml
|
4.56
|
1.36
|
2
|
0.08
|
0.008
|
储存条件:2~8℃
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