特别提示:包括RealTime PCR MasterMix(荧光探针)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RealTime PCR MasterMix(荧光探针)
英文名称:BalbStart Probe qPCR UltraMix
产品货号:JN0050
产品规格:20μl×500次
本制品向PCR体系中添加了荧光探针(TaqMan或Molecular Beacon等),在扩增过程中,荧光量与扩增产物量成正比,因此可通过荧光量来测定样品核酸量。本制品中包含DNA聚合酶、反应用Buffer及dNTPs,是2×浓度的预混型试剂,因而PCR反应液的配制十分简便。
本制品采用的酶是HotStart Taq,并结合了特别的缓冲液体系,能有效抑制非特异性反应,在更广的范围内对核酸含量进行准确定量。
本制品配有不同浓度的ROX Reference Dye,用于不同仪器校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
产品组成:
组份
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体积
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2×BalbStart Probe qPCR UltraMix
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1ml×5支
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RNase Free Water
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1ml×5支
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ROX Reference Dye I
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200μl
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ROX Reference Dye II
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200μl
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产品特点:
高特异性:采用特殊工艺制造的热启动HotStart Taq DNA聚合酶,大大提高了PCR扩增的特异性。
:百奥莱博精心配制的RealTime PCR专用2×UltraMix,具有更高扩增效率和灵敏度。
快捷:PCR反应的必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
使用建议:
请将体系上下颠倒混匀,动作轻柔,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头及Microtube等,尽量避免污染。
·用ROX Reference Dye I校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 5700/7000/7300/7700/7900/7900 HT/7900 HT Fast;Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus;其他仪器。
·用ROX Reference Dye II校准的Real Time PCR仪有:
Applied Biosystems 7500/7500 Fast;Stratagene MX4000/MX3500P/MX3000P;其他仪器。
·不需要用ROX Reference Dye校准的Real Time PCR仪有:
Bio-Rad CFX96/CFX 384/iCycler iQ5/ iQ /My iQ5/MiniOpticon/Opticon/Opticon /Chromo4;Eppendorf MasterCycler realplex/ realplex 2s。Cepheid SmartCycler;Illumina Eco qPCR;R℃he Applied Science LightCycler 480;Thermo Scientific PikoReal Cycler;Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q/Rotor-Gene 3000/ Rotor-Gene 6000;其他仪器。
常用反应体系(20μl)
成分
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体积
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2×BalbStart Probe qPCR UltraMix
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10μl
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上游引物
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0.2-1.0μM(终浓度)
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下游引物
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0.2-1.0μM(终浓度)
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探针 10uM
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0.4μl
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模板
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1-2μl
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RNase Free Water
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至20μl
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常用PCR循环:
两步法扩增程序(推荐):
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94℃
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5min
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35-40次循环
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95℃,15s
60℃,1min
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三步法PCR扩增程序(引物Tm值较低或其他原因):
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94℃
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5min
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35-40次循环
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95℃,15s
57℃,20s
72℃,30s
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储存条件:-20℃
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货号:BTN70905
规格:1.5mL
大量实验显示一定比例的明胶能够促进PCR反应。本产品为2%的明胶溶液,按1/5到1/20(具体取决于PCR反应体系)的比例加入到PCR反应体系中,可以提高PCR的效率。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
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名称:cDNA链合成试剂盒(RNase H-)
货号:YT395
规格:10次
本品是一种采用了经过改造和优化的M-MuLV反转录酶(RNase H-),用于在总RNA、mRNA等RNA模板的基础上反转录产生cDNA链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA链合成所需的各种试剂。
采用本试剂盒可以合成长达13kb的cDNA链。在采用M-MuLV反转录酶(RNase H-)的情况下,由于缺失了RNase H,RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解,这样反转录出来的cDNA的长度就会更长,并且产量更高。
试剂盒中提供了RNase Inhibitor,确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。
试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物,前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录,后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA链的合成。
试剂盒中提供的Co
ntrol Primer为17聚,即引物的长度为17个碱基。试剂盒中提供的Co
ntrol RNA为带有3’poly(A)的1.1kb RNA。
使用本试剂盒合成的链,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。
本试剂盒用于体积为20微升的cDNA链合成反应时足够进行10个cDNA链样品的合成。
产品组份:
M-MuLV反转录酶(RNase H-)(200U/μl)————2000U
Reaction Buffer(5X)———————————50μl
RNase Inhibitor(20U/μl)————————10μl
dNTP Mix(10 mM each)——————————20μl
Oligo(dT)18 Primer(0.5μg/μl)—————10μl
Random Hexamer Primer(0.2μgμl)————10μl
Co
ntrol RNA(20ng/>μl)—————————6μl
Co
ntrol Primer(5pmol/μl)————————6μl
DEPC-treated Water———————————0.2ml
储存条件:-20℃。
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