QN4109 葡聚糖凝胶G-10

葡聚糖凝胶G-10的品牌是百奥莱博，是优质的分离试剂类产品，本制品仅用于生物化学研究方面，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多葡聚糖凝胶G-10等分离试剂类产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括葡聚糖凝胶G-10在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：葡聚糖凝胶G-10
英文名称：Sephadex G-10 medium
产品货号：QN4109
产品规格：25g

葡聚糖凝胶G-10分离范围<700。

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。

葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。

葡聚糖疑胶并不熔融，可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。

使用方法：
1．葡聚糖凝胶预处理：
  在室温下，将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀，凝胶体积不再变化。
  注：在溶胀前，加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降，沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多，需要重复多次漂洗将其除去，防止层析时阻塞凝胶柱，影响流速。
2．装柱：
  将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀，可在凝胶耐受的操作压下装柱，装好的凝胶柱可以检测柱效，检测过滤柱装填是否合格。
  凝胶层析分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度：分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20～100:1，柱高过高时，凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压，应当尽可能避免；分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40～50cm以下，柱高与直径的比约为5～10:1。
3．平衡：
  上样前用平衡液平衡层析柱至少3～5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；
4．上样：
  分级分离时上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1～2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
  样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。
5．洗脱方法：
  可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化；
6．在位清洗(CIP)：
  凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7．保存：
  凝胶柱暂时不用，可将其回收，一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干，可加入0.02%叠氮化钠防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生长。

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环氧活化-琼脂糖凝胶6B以6%琼脂糖凝胶为基质，采用环氧活化的方法激活琼脂糖上的羟基，活化后即可直接用于各种配基的偶联。可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、氨基酸或糖等)的偶联。具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。

基质：6%高度交联琼脂糖凝胶
功能基团：epoxy
配基密度：20～40μM drained matrix
平均粒径：90μm
zuì大流速：300cm/h
偶联条件：pH8～10,温度4～45℃,时间1～16小时，可在水相和有机相中偶联
用途：亲和层析介质
性状：白色胶体；
储存温度：4～8℃

使用说明：
1．溶液的准备
偶联液：0.1M Na2CO3, pH8.5～10.0
封闭液：1M 乙醇胺，pH8.0
清洗液1：0.1M 乙酸-乙酸钠，0.5M NaCl，pH4.0
清洗液2：0.1M Tris-HCl，0.5M NaCl，pH8.0
保护液：含20%乙醇的1XPBS
2．样品准备
样品用偶联液溶解，浓度约5～10mg/ml。
3．样品偶联
① 取适量的环氧活化-琼脂糖凝胶6B，去除保护液，离子水清洗三次，用偶联液清洗一次。
② 将溶解好的样品中溶解后转入清洗好的环氧活化-琼脂糖凝胶6B中，填料：样品溶液体积比约为1:1。
③ 25-40℃摇床中振荡混合反应24h。注：确保树脂悬浮起来，否则会大大影响偶联效率。
④ 反应完后收集偶联样品，以便检测偶联效率。偶联液清洗一遍。
⑤ 加入等体积的封闭液，37℃振荡混合反应1h。
⑥ 将上述反应体系取出，流干其中的溶液，用3 倍柱体积的去离子水清洗树脂，清洗液1、去离子水、清洗液2和去离子水重复冲洗2次，然后保存在等体积的保护液中，于2℃～8℃保存。

注意事项：
1．不同配基的偶联方法与上面类似，但是反应的条件例如：配基加入量，反应时间，反应温度应根据配基的不同进行适当的调整；
2．可用碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液做为偶联缓冲液，但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的缓冲液。

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