大鼠活性氧使用说明书_仪器仪表样本_资料

大鼠活性氧使用说明书 应用双抗体夹心法测定标本中大鼠活性氧（ROS）水平。用纯化的大鼠活性氧（ROS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入活性氧（ROS）与HRP 标记的活性氧（ROS）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧（ROS）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠活性氧（ROS）浓度。

大鼠活性氧使用说明书

酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

标准品：720IU/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存

标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存

酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

显色剂A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存

样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上

清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心

20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次

离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程

中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/

分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞

浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分

钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器

将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待

检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。