利用酸溶液提取得到(WSP)可溶性果胶,采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半
乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应,生成物质在530 nm 处有zui大吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不
允许快递)、研钵和蒸馏水。
样品的前处理:
1、 细胞壁的提取:取约0.3g 样本,加入1mL 80%乙醇,室温快速匀浆,95℃水浴20min,
冷却至室温,4000g 25℃离心10min,弃上清。沉淀加入1.5mL80%乙醇和丙酮各洗一
遍(涡旋振荡2min 左右,4000g 25℃离心10min,弃上清即可),沉淀即为粗细胞壁,
加入1mL 试剂一(去除淀粉)浸泡15 小时,4000g 25℃离心10min,弃上清,将沉淀
干燥,称重得细胞壁物质(CWM)。
2、 WSP 的提取:称取烘干的CWM 3mg,加入1mL 试剂二,充分匀浆。8000g 4℃离心10min,
取上清液待测。