植物类elisa检测试剂盒操作要点

植物类elisa检测试剂盒操作要点
1.仔细阅读说明书，确定胰岛素ELISA试剂盒在有效期内。按说明书确定所有试剂齐全，以及所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等。
2.标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存)，尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存。
3.按胰岛素ELISA试剂盒说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂。
4.选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对。若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体，从同一家公司选择抗体。
5.一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的Elsia操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
虽然酶活性调节ELISA方法的灵敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大ELISA中，检测的灵敏度远比RIA高。根据质量作用定律。即免疫反应所形成的免疫复合物量与反应物浓度成正比。推测所检测的待测物分子数为1。已知1个摩尔浓度含6.02×1023个分子，那么理论推测酶活性放大ELISA方法的zui低检测限可达1.7×10-24mol/L。
双抗体夹心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或浅，依据所呈颜色的深浅，以号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照值的2.1倍，即为阳性。
小鼠凝血因子Ⅺ(FⅪ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅺ,FⅪ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅷ,FⅧ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅵ(FⅥ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅵ,FⅥ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅴ,FⅤ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅳ(FⅣ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅳ,FⅣ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit
小鼠凝血因子Ⅰ(FⅠ)ELISA Kit 英文名： Mouse coagulation factor Ⅰ,FⅠ ELISA Kit
小鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit 英文名： Mouse prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit 英文名： Mouse microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit
小鼠尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA Kit 英文名： Mouse uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA Kit
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA Kit 英文名： Mouse Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit
小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA Kit 英文名： Mouse urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit
小鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA Kit 英文名： Mouse brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
小鼠脑脊髓炎病毒(EV)抗体(IgG)ELISA Kit 英文名： Mouse encephalomyelitis virus(EV)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠脑啡肽原B(PDYN)ELISA Kit 英文名： Mouse Proenkephalin-B,PDYN ELISA kit
小鼠脑啡肽原A(PENK)ELISA Kit 英文名： Mouse proenkephalin A,PENK ELISA kit
小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA Kit 英文名： Mouse visfatin ELISA Kit
小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA Kit 英文名： Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit
小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA Kit 英文名： Mouse Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit
小鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(AMH)ELISA Kit 英文名： Mouse anti-Mullerian hormone,AMH ELISA kit