人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒实验中过失的方法

人骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒实验中过失的方法：
1、检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。
2、操作前仔细阅读说明书，严格按照说明书要求进行规范化操作。
3、评估试剂盒的实用性，试剂盒的稳定与否，对准确率的高低很重要。
4、加样要准确、快速。
5、使用校对过的微量移液器，排除自然误差。
6、严格掌握显色时间，显色时间过短，加入终止液反应终止后，底物结合物的量过少，易出现假阴性。
7、洗涤彻底，洗板不彻底，酶结合物本底显色会呈现假阳性。
8、严控反应时间，反应时间过长，酶失活，反应时间过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物结构松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假阴性。
时通用规则：
1）实验时，要使底物避光保存。
2）保证移液枪的准确性，误差不能超过2%，可用水和电子天平进行确定，但有专业人员进行矫正。
3）吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
4）要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支，吸取不同的液体后，要更换枪头。
5）洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底，没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
6）将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7）应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
8）ELISA试剂盒对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
9）温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
10）底物对光敏感，要在临用前现配。
11）检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
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